毛细管电泳化学发光联用技术在生物样品分析中的应用研究

摘要

随着生命科学的发展，对于生命物质中微量组分的分离和测定越来越为人们所重视。建立简单、快速、高效的分离分析手段已成为生命科学及相关领域中日益迫切的需求。毛细管电泳(Capillary Electrophoresis ， CE) 分离技术因其分离效率高、分离速度快、样品消耗少、分离装置简单及操作成本低等优点，迅速发展成为一种强有力的分离分析技术。由于CE 采用极小的样品体积和极细的毛细管内径，使得研究CE 的高灵敏检测技术成为CE 发展的重要课题。化学发光(Chemiluminescence ， CL) 检测是CE 最灵敏的检测手段之一。由于该方法无需激发光源，且光学系统简单、信号背景低、检测灵敏度高，因而CE 和CL 的联用技术能同时满足分析的选择性和灵敏度的要求，并可用于复杂样品中微量组分的分离和测定。但是，目前对该技术的研究主要围绕着仪器接口的设计和新体系的开发，应用也仅限于对无机离子、有机分子和一些药物的检测上，而涉及生物体内微量组分的分离和检测，则研究较少。本文旨在将毛细管电泳化学发光联用技术(CE-CL)应用于复杂的生物样品分析中。首先自行设计、组装了一套测定灵敏度高、操作简单的毛细管电泳化学发光检测装置；然后发展了一系列测定生物样品中微量组分的新方法。并成功的应用于人血清、猴血清、大鼠脑组织、大鼠胃组织、猴胃组织、体液、果汁等多种生物样品中氨基酸、神经递质、胍基丁胺、叶酸的测定。本论文的研究工作包括以下几个主要部分： 一、在前人工作的基础上，经过优化和改进，自行设计、组装了毛细管电泳化学发光检测装置。该装置具有组装成本低，运行费用低，操作简单，接口稳定，

目录

第一章 绪论

一、引言

二、 CE-CL联用技术

1. 在线套管式

2. 柱后套管式

3. 在柱填充固体氧化物式

4. 柱端液池式

5. 化学发光与微全分析系统(μ-TAS)联用技术

三、CE-CL 的应用研究进展

1 金属离子的检测

2 蛋白质和多肽的检测

3 氨基酸的检测

4 生物碱的检测

5 三磷酸腺苷(ATP)的检测

6 药物的检测

四、本论文主要研究工作

参考文献

第二章 生物样品中痕量氨基酸类神经递质的毛细管电泳-化学发光测定研究

1 引言

2 实验部分

2.1 主要仪器和试剂

2.2 实验方法

3 结果与讨论

3.1 实验条件优化

3.2 工作曲线和检出限

3.3 方法的精密度

3.4 样品测定

4 结束语

参考文献

第三章 人血清中游离氨基酸的毛细管电泳化学发光测定研究

1 引言

2 实验部分

2.1 主要仪器和试剂

2.2 实验方法

3 结果与讨论

3.1 发光反应条件的优化

3.2 分离条件的优化

3.3 线性范围和检测限

3.4 方法精密度

3.5 样品测定

参考文献

第四章 毛细管电泳化学发光检测定法测定叶酸的研究

1 引言

2 实验部分

2.1 主要仪器和试剂

2.2 实验方法

3 结果与讨论

3.1 Luminol浓度的影响

3.2 电泳电解质pH 值的影响

3.3 氧化溶液pH 值的影响

3.4 BrO~-浓度的影响

3.5 光照时间的影响

3.6 加热时间的影响

3.7 工作曲线、线性范围和检出限

3.8 精密度

3.9 样品测定

4、结束语

参考文献

第五章 生物样品中胍基丁胺的毛细管电泳-化学发光测定研究

1 引言

2 实验部分

2.1 主要仪器和试剂

2.2 实验方法

3 结果与讨论

3.1 分离条件的优化

3.2 发光条件的优化

3.3 测定条件的确定

3.4 方法精密度

3.5 工作曲线和检出限

3.6 样品的测定

4 结束语

参考文献

攻读硕士学位期间所发表(或待发表)的论文

致谢