外源DNA导入玉米自交系创造变异及其利用的研究

摘要

该实验采用浸种法和花粉管通道法将外源DNA导入不同玉米自交系,通过对其后代农艺性状观察、染色体数目统计、叶片结构及过氧化物酶同工酶酶谱分析,得到结果如下:1、浸种法;(1)提取黑皮甘蔗、孟加拉超甜玉米自交系以及糯玉米12-9-10自交系的总DNA,分别以三种浓度300 μ g/ml、500 μ g/ml、700 μ g/ml导入不同玉米自交系,获得最佳导入浓度为300 μ g/ml.(2)该变异株收种种植后,D<,1>代只出现一株矮杆、早熟、叶色浓绿、非对生的变异株D<,1(糯×甘300)>,D<,2>代则出现分离,得到非对生植株与对生植株的比例为112:53.(3)变异株D<,0(糯×孟甜300)>-2和D<,0(糯×孟甜500)>收种植株后,D<,1>代分别又出现了2株变异株和1株变异株.(4)组合超甜玉米5-48×糯玉米12-9-10(DNA),DNA浓度为300 μ g/ml的处理在D<,0>代获得一株变异株D<,0(甜×糯300)>.2、花粉管通道法;3、相同组合糯12-9-10×孟甜(DNA),相同的DNA导入浓度500 μg/ml,采用花粉管通道法的D<,1>代变异率1.22％高于采用浸种法的D<,1>代变异率0.59%.

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

1.玉米研究概况

2、农业分子育种的内容

3、玉米基因工程技术的发展

4、转基因作物的安全性

5、外源DNA导入整体植株技术研究概况

6、本研究工作的目的、内容及意义

第二章材料与方法

1.材料

1.1供试材料

1.2材料来源

2.试验方法

2.1处理方法

2.2主要技术路线

2.3田间试验方案

2.4田间观察与室内考种项目

2.5研究方法

2.6计算公式

第三章结果与分析

1.浸种法

1.1外源DNA导入后D0代种子的发芽状况

1.2外源DNA导入后幼苗生长速度

1.3后代植株田间农艺性状的变异情况

1.4 D0(糯×甘300)对生植株的叶片结构分析

1.5 D0代变异植株的同工酶的测定

2.花粉管通道法

2.1D1代的出苗率

2.2D1代产生的变异率

2.3 D1代变异植株的田间农艺性状表现

2.4田间农艺性状变异植株的根尖染色体数目的观察

3.花粉管通道法与浸种法的比较

第四章讨论

1.用外源DNA处理后的种子出苗结果

2.外源基因的瞬时表达

3.变异植株的过氧化物酶同工酶产生变异的原因

4.花粉管通道法的导入时间

5.处理后植株的染色体数目统计结果

6.变异材料的丰富性和随机性

7.变异率偏低的原因

8.变异材料的利用

9.今后的工作任务

结论

参考文献

致谢