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【6h】

广西猪瘟流行毒株生长特性的初步研究

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目录

前言

1.CSF及CSFV的概述

2.CSFV的基因组结构和功能

3.CSFV的抗原性与毒力

4.CSFV的病原性病理变化

5.CSFV对宿主的致病机制

6.CSFV诱导的免疫机制

7.CSFV在细胞中的增殖和与宿主细胞的关系

8.中国CSF流行现状

9.有效地控制和消灭CSF的对策

10.广西CSF流行现状和本研究的意义

材料与方法

1.材料

1.1病毒

1.2细胞

1.3实验用非免疫猪

1.4试剂及配制

1.5引物

1.6细胞培养基

1.7间接ELISA所用的溶液

1.8间接血凝实验(HA)所用溶液

1.9间接免疫荧光所用溶液

1.10免疫酶实验所用溶液

1.11仪器及其来源

2.方法

2.1技术路线

2.2病毒RNA的提取

2.3反转录

2.4聚合酶链式反应(PCR)

2.5电泳

2.6 间接ELISA检测攻毒前实验猪的猪瘟抗体效价

2.7间接血凝检测攻毒前实验猪的猪瘟抗体效价

2.8病毒活力测定

2.9实验猪的攻毒

2.10确定病毒在猪体内的复制

2.11病毒和病料的采集

2.12细胞的接毒与细胞毒的收获

2.13间接免疫荧光选择特异性高的抗猪瘟单抗

2.14免疫酶实验测定病毒毒价

实验结果

1.阳性病料鉴定结果

2.细胞接毒结果

3.ELISA和IHA检测实验猪猪瘟抗体效价

4.实验猪攻毒后的体温、临床症状和病理变化

4.1实验猪攻毒后的体温变化

4.2实验猪攻毒后的临床变化

4.3实验猪攻毒后的病理变化

5.病毒在猪体内增殖的结果

6.间接免疫荧光实验结果

7.免疫酶(免疫组化)实验检测PK-15细胞中的病毒抗原

8.病毒的毒价

9.病毒一步生长曲线

讨论

1.猪瘟病毒的来源与其病毒E2基因的同源性

2.五株猪瘟病毒在PK-15细胞中增殖活力测定

3.攻毒前实验猪体内的抗猪瘟病毒抗体滴度

4.实验猪攻毒后的体温变化、临床症状和病理变化

5.猪瘟病毒在体内的增殖

6.间接免疫荧光选择特异性的猪瘟单抗

7.免疫酶实验检测PK-15细胞中的病毒抗原

8各CSFV毒株的毒价

9.各CSFV毒株的一步生长曲线

10.CSFV毒株在宿主体内与其在体外PK-15细胞中增殖特性的比较

结论

参考文献

致谢

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摘要

该实验采用RT-PCR技术对该实验室保存的8份广西各地的猪瘟病猪的脾脏和淋巴结进行诊断,检出其中3份为CSF阳性,分别来自广西梧州、博白和北海地区.以这3株猪瘟野毒和中国标准石门株病毒、疫苗毒为材料,研究其在宿主体内和体外PK-15细胞中增殖的基本特性和差异.该实验中,3株猪瘟野毒和石门株病毒在宿主体内增殖时,CSFV石门株和梧州株引起猪体发病的体温变化、临床症状和病理变化相似,都为

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