小鼠卵丘细胞线粒体移植对早期胚胎发育潜能的影响

摘要

为了探讨卵丘细胞线粒体移植对高龄妇女早期胚胎发育潜能的影响。本研究以昆明白小鼠为动物模型，分两部分对此进行研究。第一部分，以年老、年轻小鼠作比较，先用Hoechst 33258染色，荧光显微镜观察，计算比较2-3月龄的生育高峰期与12月龄左右老龄小鼠卵丘细胞的凋亡率，经统计分析二者无显著差异(p>0.05)；为了避免荧光显微镜下计算结果的主观性，用Hoechst 33258与PI双重染色，再用流式细胞仪检测年老与年轻小鼠卯丘细胞凋亡率，二者亦无显著差异(p>0.05)。说明卵丘细胞的凋亡与年龄无关，老龄小鼠卯丘细胞线粒体移植是可行的，但因为存在凋亡与坏死，可能会对移植效果有影响。因此，对12月龄左右的老龄小鼠的卵母细胞进行ICSI+线粒体移植(MIT)，结果，MIT+ICSI组与ICSI组的卯裂率无显著差异(56.9％VS 50％；p>0.05)，但囊胚率差异显著，(32.54％±7.93 VS 24.977％±5.65；p<0.05)。本试验还将线粒体移植到老龄小鼠体内冲出的受精卯中，以不注射作为对照组，结果对照组的卵裂率和囊胚率均比空注组有显著差异(39.33％VS 60％；19.67％VS46％;p<0.05)：空注组与MIT组的卵裂率、囊胚率相比亦有显著差异，(39.33％VS 67.90％；19.67％VS 51.54％；p<0.05)；但不注射组与MIT组相比其卵裂率及囊胚发育率均无显著差异(p>0.05)。

目录

文摘

英文文摘

第一部分文献综述 第一章年龄、线粒体与女性生殖能力的关系

第一部分文献综述 第二章小鼠卵丘细胞凋亡情况的研究

第一部分文献综述 第三章小鼠单精注射(ICSI)的初步研究

第二部分试验部分 第一节引言

第二部分试验部分 第二节材料与方法

第二部分试验部分 第三节试验结果

第二部分试验部分 第四节分析讨论

结论

参考文献

附录

附图

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章