番茄温敏核不育系及杂交组合花药培养研究

摘要

本论文以番茄温敏核不育系及杂交组合(大107、地D4、大107×牛番茄、地D4×红昆仑)为试验材料进行花药培养研究,主要包括3个方面(1)番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导试验;(2)番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化试验;(3)番茄温敏核不育系花药及愈伤组织的细胞学观察。主要研究结果如下:
　　 1番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织诱导试验结果:
　　 (1)在2,4-D配合6-BA或KT进行的双因子的激素配组愈伤组织诱导的比较试验中,以2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L组合的效果最好,番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导率最高,分别为:大107(35.80％)、大107×牛番茄(25.85％)、地D4(36.65％)、地D4×红昆仑(28.13％)。
　　 (2)在2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L的基础上,分别与CPPU、TDZ、KT、ZT进行3因子激素组合花药愈伤组织诱导比较试验,以2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT1.5mg/L组合效果最好,愈伤组织诱导率分别为:大107(65.07％)、大107×牛番茄(43.10％)、地D4(66.20％)、地D4×红昆仑(46.76％)。
　　 (3)4℃不同时间的预处理试验结果表明:亲本以72h为最佳预处理时间,愈伤组织诱导率分别为大10770.70％、地D471.55％,此时花药出愈时间也最早;杂交组合以预处理时间96h时,愈伤组织诱导率达到最大值,分别为大107×牛番茄51.14％、地D4×红昆仑53.71％,此时花药愈伤组织的出愈时间也最早。
　　 (4)在3种基本培养基比较试验中,MS培养基对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导效果优于N6、white培养基。花药愈伤组织诱导率分别为大10764.79％、大107×牛番茄43.66％、地D465.63％、地D4×红昆仑47.32％。
　　 (5)在不同时间的光照处理中,以全暗处理的番茄花药愈伤组织出愈率最高,且褐化率最低,愈伤组织质地松软,有光泽,生长旺盛,愈伤组织诱导率分别为:大10764.79％、大107×牛番茄43.50％、地D465.54％、地D4×红昆仑47.46％。
　　 (6)在相同激素组合的条件下,以MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT1.5mg/L配合蔗糖浓度为35g/L的效果最佳,愈伤组织诱导率分别为大10764.44％、大107×牛番茄43.61％、地D466.94％、地D4×红昆仑47.50％。
　　 (7)在番茄花药愈伤组织的防褐化试验中,以PVP浓度为1.0g/L时的防褐化效果最好。花药愈伤组织褐化率分别为:大10723.01％、大107×牛番茄39.20％、地D420.74％、地D4×红昆仑37.22％;出愈率分别为:大10773.58％、大107×牛番茄52.29％、地D475.28％、地D4×红昆仑56.57％。
　　 (8)在氨基酸的比较试验中,亲本以P2处理(2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT1.5mg/L+Pro500mg/L+GLy50mg/L)的效果最好,愈伤组织诱导率分别为:大10781.49％、地D483.43％;杂交组合以P3处理(2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT1.5mg/L+Pro500mg/L+Gly75mg/L)的效果最优,愈伤组织诱导率分别为:大107×牛番茄59.23％、地D4×红昆仑64.74％。
　　 2番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织分化试验结果:
　　 (1)通过NAA、6-BA、KT、CPPU、TDZ、ZT等激素进行不同组合的愈伤组织分化比较试验,结果表明:在S5(MS+NAA0.1mg/L+KT1.0mg/L+6-BA2.0mg/L)、V3(MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+TDZ0.04mg/L)、W4-W5(MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+ZT(0.6-0.8))mg/L激素组合上番茄温敏核不育系4个品种能分化出芽,分化率分别为:S5(大1072.22％、地D44.44％);V3(大1074.44％、大107×牛番茄2.22％、地D42.22％);W4-W5(大1076.67％、地D44.44％、大107×牛番茄2.22％、地D4×红昆仑2.22％)。
　　 (2)椰汁不同浓度的分化比较试验中,以MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+椰汁10％组合分化效果最好,分化率分别为:大1078.89％、大107×牛番茄2.22％、地D46.67％、地D4×红昆仑4.44％。
　　 (3)从番茄温敏不育系及杂交组合花药愈伤组织分化中,经芽的形成与生根,获得再生完整植株。
　　 3番茄温敏核不育系花药培养途径显微观察
　　 在番茄温敏核不育系花药愈伤组织形成途径中,通过石蜡切片,可观察到单核靠边期花粉粒、二胞体、多细胞球等时期,及能见到胚性与非胚性愈伤组织。