玻利维亚秋海棠和日本核桃组培技术研究

摘要

以目前难繁殖的两种植物,玻利维亚秋海棠和日本核桃为试验材料,针对生产中出现的生产效率低,品种一致性难以维持以及组培中出现的污染率较高,外植体褐变严重等问题,进行了玻利维亚秋海棠Crackling Fire(Begonia boliviensis)和日本核桃(Juglans mandshurica var.sachalinensis)的组培技术开发的研究。主要结果如下:
　　1.玻利维亚秋海棠组培技术的开发
　　(1)对于4个品种玻利维亚秋海棠‘Crackling Fire’来说,最佳的灭菌方法是,将采取的外植体用中性洗剂洗净后用自来水反复冲洗,然后放入浓度为70％的乙醇中分别浸泡60s,接着放入添加Tween20的浓度为1%的次氯酸钠(NAClO)溶液中浸泡10min,之后在超净操作台上用灭菌水冲洗4次。
　　(2)初代培养最适的外植体为茎段。初代培养的最适培养基为1/2N MS+TDZ10.0μM+NAA0.1μM+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。
　　(3)继代培养中,对粉色(B.boliviensis var.sunjirapi),乳黄色(B.boliviensis var.sunjiracrem)和橙色(B.boliviensis var.sunjiraore)品种,最适培养基组合为1/2N MS+TDZ10.0μM+NAA0.1μM+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。
　　(4)生根培养中,对对粉色(B.boliviensis var.sunjirapi),乳黄色(B.boliviensis var.sunjiracrem)和橙色(B.boliviensis var.sunjiraore)品种,最适生根培养基组合为1/2N MS+CPPU0.1μM+NAA0.1μM+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,生根率为100%。
　　(4)对粉色(B.boliviensis var.sunjirapi),乳黄色(B.boliviensis var.sunjiracrem)和橙色(B.boliviensis var.sunjiraore)品种来说,使用单个芽作为外植体进行增殖培养是增殖效率最高的方法,6周培养的增殖率分别为10.5、10.1和14.8。
　　2.日本核桃的组培技术的开发
　　(1)对于日本核桃来说,最佳的灭菌方法是,将采取的外植体用中性洗剂洗净后用自来水反复冲洗,然后放入浓度为70%的乙醇中分别浸泡60s,接着放入添加Tween20的浓度为1%的次氯酸钠(NAClO)溶液中浸泡12min,之后在超净操作台上用灭菌水冲洗4次。
　　(2)初代培养中,目前最适的培养基组合为WPM+TDZ1.0μM+Gelrite2 g/L+蔗糖30g/L和WPM+Zeatin10.0μM+Gelrite2g/L+蔗糖30g/L,培养基中添加5.0mg/L的Vc作为抗氧化剂抑制褐变,pH调整为5.8。
　　(3)继代培养中,添加了Zeatin的培养基叶的分化更完全,且生长速度更快。添加了TDZ的培养基中诱导产生了更多的愈伤组织。

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第一章 前言

1.1 植物组织培养概念

1.2 难繁殖性植物的研究现状

1.3 研究的目的与意义

第二章 材料与方法

2.1玻利维亚秋海棠组培技术开发

2.2日本核桃的组培技术的开发

第三章 结果与分析

3.1玻利维亚秋海棠组培技术的开发

3.2日本核桃组培技术的开发

第四章 结论

4.1玻利维亚秋海棠组培技术的开发

4.2日本核桃组培技术的开发

第五章 讨论

5.1 关于玻利维亚秋海棠无菌体系的建立

5.2 关于日本核桃的无菌体系的建立

5.3 存在问题与建议

参考文献

附录

致谢

攻读学位期间发表论文情况