声明
摘要
1 前言
1．1 植物蔗糖转运蛋白的研究进展
1．2 植物的农杆菌介导转化法
1．3 关于甘蔗SoSUT5基因的研究背景
1．4 甘蔗转基因的研究进展
1．5 本研究的目的、意义及技术路线
1．5．1 本研究的目的、意义
1．5．2 本研究的技术路线
2 烟草的遗传转化
2．1 材料
2．1．1 植物材料
2．1．2 菌株及质粒
2．1．3 试剂
2．1．4 仪器设备
2．1．5 培养基及溶液的配制
2．2 实验方法
2．2．1 目的基因获得
2．2．2 构建重组载体pRI 101-ON-SoSUT5
2．2．3 农杆菌感受态细胞EHA105的转化
2．2．4 农杆菌介导的烟草叶盘法转化
2．2．5 转化植株的检测及可溶性糖含量测定
2．3 结果与分析
2．3．1 目的基因的获得
2．3．2 双子叶表达载体的构建
2．3．3 农杆菌感受态细胞EHA 105的转化
2．3．4 农杆菌介导的烟草叶盘法转化
2．3．5 转化植株的检测及可溶性糖含量测定
2．4 讨论
2．5 小结
3 RNAi表达载体的构建
3．1 材料
3．1．1 植物材料
3．1．2 菌种及质粒
3．1．3 试剂
3．1．4 仪器设备
3．1．5 培养基及溶液的配置
3．2 pTCK 303干扰载体构建
3．2．1 干扰片段的获得
3．2．2 构建单向片段插入的重组质粒
3．2．3 构建双向片段插入的重组载体
3．2．4 转化农杆菌EHA105感受态
3．3 抗性筛选试验
3．4 结果与分析
3．4．1 RNAi载体的构建
3．4．2 抗性筛选试验
3．5 讨论
3．6 小结
4 甘蔗的遗传转化
4．1 材料
4．1．1 植物材料
4．1．2 菌种及质粒
4．1．3 试剂
4．1．4 仪器设备
4．1．5 培养基及溶液的配置
4．2 pUBTC真核表达载体构建
4．2．1 目的基因获得
4．2．2 构建重组载体
4．2．3 转化农杆菌EHA105感受态
4．3 农杆菌介导的甘蔗转化
4．3．1 农杆菌侵染液的制备
4．3．2 甘蔗愈伤的获得
4．3．3 甘蔗愈伤侵染转化
4．3．4 甘蔗愈伤转化后的培养
4．4 阳性植株的检测
4．4．1 甘蔗基因组DNA的提取
4．4．2 PCR检测
4．5 结果与分析
4．5．1 目的基因的获得
4．5．2 载体的构建
4．5．3 转化农杆菌
4．5．4 转基因甘蔗植株再生
4．5．5 阳性植株的检测
4．6 讨论
4．7 小结
5 全文总结与展望
5．1 全文总结
5．2 展望
参考文献
致谢
附录
作者在攻读硕士学位期间学术活动和论文发表等情况
广西大学;
