声明
摘要
常用缩写词
第一章文献综述
1．1病原学研究
1．2 FPV分子生物学
1．3 FPV流行病调查研究
1．4展望
2免疫球蛋白G(IgG)研究进展
2．1 IgG分子学研究
2．2 IgG提取方式及应用
2．3展望
3本研究的目的与意义
第二章猫细小病毒分离鉴定及VP2基因遗传进化和氨基酸位点分析
1材料
1．1病料
1．2主要试剂及细胞株
1．3主要仪器设备
2方法
2．1引物设计
2．2病料处理
2．3病毒DNA提取
2．4 F81细胞复苏、传代和冻存
2．5病毒分离
2．6病毒基因组DNA提取
2．7病毒鉴定及VP2基因扩增
2．8血凝(HA)试验
2．9电镜观察
2．12分离株VP2序列分析
2．13分离株VP2差异位点分析
3试验结果
3．1肛试子PCR检测结果
3．2病毒分离结果
3．3分离株血凝试验结果
3．4电镜形态观察结果
3．5分离毒株TCID50测定结果
3．6分离株理化性质测定结果
3．7分离株VP2基因克隆与分析
3．8分离株VP2基因遗传进化分析
3．9分离株VP2氨基酸位点差异性分析结果
4讨论
5本章小结
第三章猫细小病毒GX01毒株全基因测定及动物模型的建立
1材料
1．1细胞株及病毒
1．2试验动物
1．3主要试验试剂
1．4主要仪器
2方法
2．1 GX01株全基因测序及分析
2．2 FPV发病动物模型的建立
3试验结果
3．1 GX01全基因扩增及遗传进化分析
3．2 FPV发病模型构建
4讨论
5本章小结
第四章FPV F(ab’)2提取与纯化及其预防效果初步评价
1材料
1．1细胞株及毒株
1．2实验动物
1．3主要试剂
1．4主要仪器
2方法
2．1病毒大量增殖培养
2．2灭活病毒
2．3 FPV蜂胶灭活苗制备
2．4 FPV油乳灭活苗制备
2．5马匹的免疫
2．6马血清HI效价的测定
2．7 IgG提纯方法
2．8 IgG浓度和HI效价的测定
2．9 IgG纯度检测
2．10 IgG酶切时间的确定
2．11 F(ab’)2分离纯化
2．12 F(ab’)2纯度测定和回收率计算
2．13 F(ab’)2无菌、物理性状和安全性检测
2．14 F(ab’)2 HI效价和细胞中和抗体效价的测定
2．15动物预防保护试验
3试验结果
3．2 FPV灭活苗制备与检验
3．3两种不同佐剂灭活苗免疫效果比较
3．4 IgG提纯方法比较结果
3．5 IgG HI效价测定结果
3．6 IgG纯度测定结果
3．7 IgG酶切时间的确定结果
3．8 F(ab’)2纯化结果
3．9 F(ab')2含量测定和回收率的结果
3．10 F(ab’)2无菌检验结果
3．11 F(ab’)2物理性状及安全性检测结果
3．12免疫球蛋白F(ab')2 HI和中和试验结果
3．13免疫球蛋白F(ab’)2体内试验结果
4讨论
5本章小结
全文总结
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况
