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中草药体外抑菌筛选及对草鱼生理功能影响的研究

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第一章前言

1.1研究目的和意义

1.1.1实验动物的研究意义

1.1.2试验中草药添加剂的研究意义

1.2中草药饲料添加剂的国内外研究进展

1.2.1中草药饲料添加剂的作用

1.2.2中草药的作用原理

1.2.3中草药饲料添加剂在水产养殖中的应用

1.2.4中草药饲料添加剂目前存在的问题及以后的发展趋势

1.3研究内容和技术路线

1.3.1研究内容

1.3.2技术路线

第二章中草药体外抑菌筛选试验

2.1引言

2.2材料与方法

2.2.1仪器与试剂

2.2.2实验中草药

2.2.3试验菌种

2.2.4中草药水提取液的制备

2.2.5中草药水乙醇提取液的制备

2.2.6试验菌液的制备

2.2.7实验药敏纸片的制备

2.2.8抑菌效果的测定

2.2.9统计处理

2.3结果与分析

2.3.1中草药提取物对荧光假单胞菌的抑菌试验

2.3.2中草药提取物对斑点气单胞菌的抑菌试验

2.3.3中草药提取物对苏伯利产气单胞菌的抑菌试验

2.4讨论

2.5 小结

第三章白头翁乙醇提取物对草鱼蛋白酶活性的影响

3.1引言

3.2材料与方法

3.2.1试验器材

3.2.2试验草鱼

3.2.3试验水族箱

3.2.4试验饲料

3.2.5试验设计与分组

3.2.6草鱼饲养

3.2.7采样

3.2.8蛋白酶的提取

3.2.9蛋白酶活性测定(福林—酚法)

3.2.10统计处理

3.3结果与分析

3.3.1标准曲线数据

3.3.2标准曲线图与方程

3.3.3肝胰脏中蛋白酶活性测定结果

3.3.4中肠组织中蛋白酶活性

3.4讨论

3.5小结

第四章白头翁乙醇提取物对草鱼血常规指标的影响

4.1引言

4.2材料与方法

4.2.1仪器与试剂

4.2.2实验动物与饲料及其动物饲养

4.2.3取样

4.2.4血常规指标的测定

4.2.5统计处理

4.3结果与分析

4.3.1红细胞数

4.3.2白细胞数

4.3.3淋巴细胞数

4.3.4血红蛋白浓度

4.3.5红细胞压积

4.3.6中性粒细胞数目

4.4讨论

4.4.1白头翁乙醇提取物对草鱼血细胞数目和血红蛋白浓度的影响

4.4.2白头翁乙醇提取物对草鱼血细胞压积的影响

4.4.3白头翁乙醇提取物对草鱼血液中白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数目的影响

4.5小结

第五章白头翁乙醇提取物对草鱼肝功能指标的影响

5.1引言

5.2材料与方法

5.2.1仪器与试剂

5.2.2实验动物和饲料以及动物饲养

5.2.3采血取样

5.2.4肝功能生化指标的测定

5.2.5统计处理

5.3结果与分析

5.3.1谷丙转氨酶活性

5.3.2谷草转氨酶活性

5.3.3碱性磷酸酶活性

5.3.4总蛋白

5.3.5白蛋白浓度

5.3.6白蛋白与球蛋白浓度比(A/G)

5.4讨论

5.4.1白头翁乙醇提取物对草鱼血液中谷丙转氨酶和谷丙转氨酶活性的影响

5.4.2白头翁乙醇提取物对草鱼血液中碱性磷酸酶活性的影响

5.4.3白头翁乙醇提取物对草鱼血液中总蛋白、白蛋白、球蛋白及A/G的影响

5.5小结

第六章白头翁乙醇提取物对草鱼免疫指标的影响

6.1引言

6.2材料与方法

6.2.2实验动物和饲料以及动物饲养

6.2.3采血取样

6.2.4解剖取样

6.2.5统计处理

6.3结果与分析

6.3.1补体C3浓度

6.3.2补体C4浓度

6.3.3 C-反应蛋白浓度

6.3.4肝胰脏指数

6.3.5脾脏指数

6.3.6肾脏指数

6.3.7头肾指数

6.4讨论

6.4.1补体C3和C4

6.4.2 C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)

6.4.3免疫器官指数

6.5小结

第七章结论和展望

7.1结论

7.2本研究的创新点

7.3进一步要解决的问题

参考文献

致谢

个人简历

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摘要

本课题通过体外抑菌试验对初步选择的6种中草药进行近一步的筛选,筛选出抑菌效果最佳的一种,然后将其经过适当的提取步骤后,将提取物添加到草鱼基础日粮当中,进行草鱼养殖试验,研究其对草鱼的生理功能的影响。试验一体外抑菌试验在对荧光假单胞菌,0.1g/mL组,大黄水提液、五倍子水提液、黄芩乙醇提取液、大黄乙醇提取液均抑菌效果明显(P<0.05),白头翁乙醇提取液抑菌效果极显著(P<0.01)。在对肠型点状气单胞菌,0.1g/mL组,大黄水提掖、金银花水提液、白头翁水提液、白头翁乙醇提取液抑菌效果显著(P<0.05)。在对苏伯利气单胞菌,0.1g/mL组,大黄水提液、五倍子水提液、黄芩乙醇提液效果显著(P<0.05),金银花水提液和白头翁乙醇提液组极显著(P<0.01)。其中白头翁乙醇提取物对三种菌的抑制效果最佳,选择其作为草鱼养殖试验的中草药添加剂。实验二白头翁乙醇提取物对草鱼生理性能的影响1)可明显增强草鱼肝胰脏和中肠蛋白酶活性(P<0.01),且随着添加量增加而增加。其中0.5%添加组在第10天时使肝胰脏和中肠中蛋白酶的活性分别提高350%和180%。 2)可增加草鱼血液中红细胞个数、血红蛋白的浓度和白细胞个数。在第30天的时候,1%添加组红细胞个数可提高24.5%,血红蛋白浓度增加10.7%,白细胞个数增加53.9%,均达到显著的程度(P<0.05)。 3)在整个过程当中可明显降低草鱼血液中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性,对碱性磷酸酶的活性在实验的后期同样表现为降低的作用。在第10天的时候,0.5%添加组谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性分别降低70.9%和6.4%,分别达到极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)的程度,对碱性磷酸酶在第30天时,可降低34.6%,差异极显著(P<0.01)。 4)在实验的后期可增加补体C3的量和在全过程当中降低C-反应蛋白浓度。其中在30天时,1%添加组补体C3增加达到显著的程度(P<0.05),C-反应蛋白浓度降低77.9%,差异极显著(P<0.05). 综合以上所述,白头翁乙醇提取物的抑菌效果最佳。根据实验结果可知,白头翁乙醇提取物具有提高草鱼消化力、提高物质代谢速度、提高免疫力、保护肝胰脏功能的作用。

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