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钛颗粒在人工关节无菌性松动中的作用

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目的:(1)建立人工关节磨损颗粒与原代人巨噬细胞相互作用的体外模型.(2)分析不同直径、不同浓度的钛颗粒对巨噬细胞刺激作用的影响.材料与方法:(1)抽取5位健康志愿者外周血各100ml,根据不同细胞成份比重的不同以及单核细胞系贴壁的特性,应用梯度离心、洗涤等方法分离原代人单核细胞,使单核细胞系纯度达98-99%,并使其分化成巨噬细胞.(2)将钛颗粒溶液分别以10 μ m和0.2 μ m滤孔的滤膜过滤,留取直径大于10 μ m和直径在0.2-10 μ m之间这两种颗粒样本.颗粒称重以获取其质量,用70%酒精和纯水冲洗并以环氧乙烷消毒以去除其表面的内毒素.最后将直径大于10 μ m和小于10 μ m两种不同的颗粒分别按颗粒体积(μ m<'3>):细胞数配比成10:1及100:1的实验浓度.(3)将不同直径、不同浓度的钛颗粒刺激原代人巨噬细胞,并进行阴性对照和阳性对照.阴性对照是单纯巨噬细胞培养,其中没有加入钛颗粒,阳性对照是培养液中加入1 μ g/ml的LPS内毒素刺激巨噬细胞.(4)应用ELISA方法测定巨噬细胞受刺激后所产生的前炎症因子IL-1 β、IL-6和TNF α的浓度.(5)实验结果运用SPSS统计软件,采用完全随机分组t检验统计数据(检验水平α=0.05).结论(1)不含内毒素的钛颗粒本身具有刺激巨噬细胞产生溶骨介质的作用.(2)钛颗粒对巨噬细胞的刺激作用存在着个体差异.(3)高浓度、直径小于10μm的钛颗粒可刺激人巨噬细胞分泌更多的溶骨介质,具有较强的生物活性.

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