前列腺癌和前列腺增生诊断标记的研究

摘要

前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)是泌尿外科常见的老年男性疾病,中国13.6％的老年男性患前列腺增生症:在西方国家前列腺癌死亡人数仅次于第一位的肺癌.当前临床诊断中使用前列腺特异抗原(PSA)作为前列腺癌和前列腺增生的主要鉴别诊断手段,然而由于PSA并非前列腺癌细胞所特有,血浆中PSA升高是前列腺癌细胞浸润正常细胞,导致前列腺液中PSA扩散到血液中所引起.前列腺增生、前列腺炎,甚至乳腺癌等多种疾病亦会引起血浆中PSA升高.当PSA在4~10 ng/ml时,难以区分PCa和BPH.因此临床有必要寻找比PSA更可靠的诊断指标.,PCa是多因素、多基因突变引起的疾病,凭单一指标的检测无法准确判断.近期,人们通过DNA微阵列技术,发现多个基因表达的变化与PCa病程相关,如能结合临床病理学研究,未来可作为PCa病程的生物标记.该论文利用国内外PCa和BPH相关基因研究成果,经充分的文献调研,预选了9个基因(KLK3/PSA、KLK2、KLK11、pim-1、hepsin、PSMA、AR、p27 IGF-1)作为研究对象,通过小型DNA微阵列技术和荧光定量PCR技术,结合PCa和BPH临床样本,对样本中9个基因的表达进行检测.研究中设计了9个基因和1个内参基因β-actin的引物,PCR扩增制备各基因探针序列后成功克隆到质粒载体中;运用包含这10个基因的小型DNA微阵列和荧光定量PCR技术共检测了25例临床样本,两种技术检测结果证明,这9个基因组合能明显区分PCa和BPH,其中KLK2、pim-1、AR、IGF-1可作为检测基因的核心组合.

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

第1章文献综述

1.1.PCa和BPH的研究进展

1.2.DNA微阵列

1.3.实时荧光定量PCR

1.4.本研究拟解决的问题

第2章前列腺癌与前列腺增生相关基因的选择和克隆

2.1.材料和试剂

2.2.实验方法

2.3.实验结果

2.4.讨论

第3章小型DNA微阵列制备与杂交

3.1.材料和试剂

3.2.实验方法

3.3.结果

3.4.讨论

第4章实时荧光定量PCR检测PCa和BPH

4.1.材料和试剂

4.2.实验方法

4.3.结果

4.4.讨论

总结

参考文献

附录

附录1临床样本资料

附录2小型DNA微阵列杂交原始数据

附录3荧光定量PCR数据

附录4相关网站

致 谢

论文原创性说明