神经生长抑制因子Nogo-A及其受体NgR在实验性脑梗死后不同时相的表达

摘要

缺血性脑卒中后导致病灶中心神经元坏死，引起严重的神经功能障碍，至今缺乏有效的治疗和康复措施。一个重要的原因是中枢神经不能再生。但近年来的研究显示，中枢神经组织中普遍存在神经生长抑制因子，如中枢髓鞘来源的的抑制因子(CNSmyelin-derivedinhibitor)、硫酸软骨素蛋白多糖(ChondroitinSulfateProteoglycans，CSPG)、Semiphorin3、netrins、ephrins和星形胶质细胞分泌的tenascins等。如能有效阻断这些神经生长抑制因子的作用，中枢神经组织可以获得和外周神经组织同样的再生能力。 目前已确认的中枢神经髓鞘来源的抑制因子至少有以下三种：Nogo-A、髓鞘相关性糖蛋白(myelinassociatedglycoprotein，MAG)和少突胶质细胞蛋白多糖(oligodendrocytemyelinglycoprotein，OMgp)。其中Nogo-A是作用最强的神经生长抑制因子。Nogo-A包含两个作用位点：Nogo-66和Amino-Nogo。Nogo-A、MAG和OMgp均通过Nogo-66的受体NgR结合发挥抑制神经再生作用。 目的：观察神经生长抑制因子Nogo-A及其受体NgR在大鼠实验性脑梗死后梗死灶周不同时点表达的变化，探讨Nogo-A及其受体NgR在脑梗死后对神经再生的作用。 方法：将易卒中型肾血管性高血压大鼠的右侧大脑中动脉皮层支闭塞建立缺血性脑梗死(MCAO)模型，采用免疫组化技术结合荧光定量PCR技术，在大鼠缺血性脑梗死后1、2、4和8周检测梗死灶周Nogo-A及其受体NgR的表达量。 结果：一、MCAO大鼠Nogo-A的表达免疫组化结果显示，Nogo-A表达于皮层及皮层下的少突胶质细胞、神经元的胞浆。阳性信号呈棕黄色条索状神经纤维髓鞘以及有突起的神经元形态。1、2、4和8周Nogo-A的阳性信号值分别为0.44±0.04、0.48±0.04、0.54±0.03和0.40±0.06，假手术组为0.39±0.06、0.41±0.09、0.40±0.09和0.39±0.06。Nogo-A含量先呈逐渐上升趋势，第4周达到高峰，和假手术比较均有明显差异(p＜0.05)第8周降至假手术组水平(p＞0.05)。假手术组之间比较没有明显差异(p＞0.05)。 二、MCAO大鼠NgR的表达免疫组化结果显示，NgR表达于皮层及皮层下神经元细胞的胞浆。阳性信号呈棕黄色有突起的神经元形态。1、2、4和8周NgR的阳性信号值分别为0.39±0.02、0.56±0.03、0.59±0.04和0.51±0.04；假手术组为0.34±0.05、0.34±0.04、0.35±0.05、0.35±0.06。NgR含量逐渐上升，第4周达高峰，第8周下降，但高于假手术组水平。在1、2、4和8周，MCAO组和假手术组比较均有明显差异(p＜0.05)。假手术组之间没有明显差异(p＞0.05)。 三、MCAO大鼠Nogo-AmRNA的表达荧光定量PCR显示：Nogo-A的相对值(Nogo-A的拷贝数/GAPDH的拷贝数)在1、2、4和8周分别为0.112±0.011、0.194±0.022、0.249±0.016和0.166±0.033；假手术组分别为0.089±0.01、0.09±0.006、0.10±0.019和0.092±0.015。Nogo-AmRNA表达先上升，第4周达到高峰，第8周下降，但高于假手术组；在1、2、4和8周，MCAO组和假手术组比较均有明显差异(p＜0.05)。假手术组之间没有明显差异(p＞0.05)。 四、MCAO大鼠NgRmRNA的表达NgR的相对值(NgR的拷贝数/GAPDH的拷贝数)在1、2、4和8周分别为0.113±0.006、0.159±0.011、0.197±0.016、0.093±0.027，假手术组分别为0.085±0.008、0.085±0.01、0.089±0.01、0.091±0.007。NgRmRNA表达逐渐上升，第4周达到高峰，和假手术比较均有明显差异(p＜0.05)，第8周降至假手术组水平(p＞0.05)。假手术组之间比较没有明显差异(p＞0.05)。 结论：脑梗死损伤可以刺激梗死灶周围脑组织Nogo-A及其受体NgR表达增加，这种作用在4周达到高峰，它们可能是造成成年哺乳动物脑梗死损伤后神经再生障碍的重要原因之一。

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结 果

讨 论

结 论

参考文献

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