石斛兰（Dendrobium chrysopterum）内生菌的分离及其生物防治功能研究

摘要

本文对石斛兰的内生菌及其生物防治能力和解磷能力进行了研究。以珠海市农业科学研究中心栽培的双色石斛(Dendrobiumchrysopterum)为研究对象，从双色石斛的健康植株叶片中分离得到51株细菌，53株真菌。初步鉴定结果显示，51株细菌均属于芽孢杆菌属(Bacillus)，以地衣芽孢杆菌(B.licheniforms)为主；真菌则属于14个属和一些无孢菌群。 从石斛兰中分离了常见病害——叶斑病的病原菌B10b，并鉴定为乳酸镰孢霉菌(FusariumlactisPir.etRib)。 在离体条件下，通过平板拮抗实验测定了不同内生菌菌株对叶斑病病原B10b的拮抗能力，有35株内生细菌对叶斑病病原B10b表现出拮抗能力，以凝结芽孢杆菌(B.coagulans)R14和地衣芽孢杆菌(B.lichemforms)R21的拮抗能力最强，内生真菌对病原B10b无拮抗作用。以R14和R21为研究对象，测定了它们对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、铜绿色假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilus)、黑曲霉(Aspergillusniger)、新月弯孢霉(Curvularialunata)、梨黑斑交链孢霉(Alternariakikuchiana)、芒果蒂腐菌(Diplodianatalensis)、西瓜枯萎菌(Fusariumoxysporum)、白色念珠菌(Candidaalbicans)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的拮抗能力，结果显示，R14对金黄色葡萄球菌、酿酒酵母和芒果蒂腐菌表现出微弱抗性(抑菌带宽度＜5mm)，对铜绿色假单胞菌、白色念珠菌、梨交链孢霉和西瓜枯萎菌表现出较强的抗性(10mm＞抑菌带宽度≥5mm)；R21对铜绿色假单胞菌和酿酒酵母表现出微弱抗性(抑菌带宽度＜5mm)，对白色念珠菌、芒果蒂腐菌表现出较强的抗性(10mm＞抑菌带宽度≥5mm)，对新月弯孢霉、梨黑斑交链孢霉和西瓜枯萎菌表现出很强的抗性(抑菌带宽度≥10mm)，表明R21对真菌具有较好的抗性。R14和R21对石斛兰叶斑病病原B10b具有拮抗作用的机理作初步研究，发现两菌株分泌的活性物质能抑制病原菌的生长，但作用较弱，其发酵液可抑制病原孢子萌发，抑制率为64％与72％。温室防治试验证明，R14和R21对石斛兰叶斑病均有较好的生物防治效果，防效分别达到70.13％、67.53％。 另外，以溶磷圈法对石斛兰内生菌作解磷菌的筛选，发现有10株细菌及2株真菌具有解磷能力，以环状芽孢杆菌(B.circulans)R10、地衣芽孢杆菌(B.licheniforms)R25和R47的溶磷量较高，分别达36.11μg/mL、39.77μg/mL、39.31μg/mL，真菌T35(Sphaerocreassp.)、T37(Chromasporiumsp.)的溶磷量仅为11.00μg/mL和11.42μg/mL。

目录

文摘

英文文摘

第1章 前言

第2章 石斛兰叶斑病病原菌的分离、纯化及鉴定

第3章 石斛兰内生菌的分离、纯化及鉴定

第4章 具有拮抗活性内生菌的筛选及其拮抗机理初探

第5章 R14、R21对石斛兰叶斑病的温室防治试验

第6章 石斛兰内生菌解磷能力的检测

总结

参考文献

附录攻读硕士学位期间发表的论文

致谢

原创性声明