肾素-血管紧张素系统基因多态性与冠心病合并慢性心力衰竭的关联研究

摘要

慢性心力衰竭(CHF)是严重危害人类健康的常见病，对其病因的探讨一直是研究的热点。肾素一血管紧张素系统(RAS)在维持体内水、电解质平衡和调节血管张力及CHF的病理生理过程中扮演着重要的角色。近年来，对RAS在基因水平的研究已渐成熟，特别是有关其中的两个关键成分即血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性和血管紧张素原(AGT)基因多态性与心血管疾病关系的研究已有较为广泛的开展，目前有资料表明多种心血管疾病的发生、发展、预后甚至对药物的反应均与RAS基因多态性相关，但其与CHF关系的研究仅处于起步阶段，目前国内外的研究结果也不甚一致，然多数研究是将CHF患者作为一个总的群体来研究，而对构成心衰的单病种深入分层研究及其与RAS基因多位点联合研究的报告较少。本研究以冠心病患者为研究对象探讨CHF的遗传病因学发病机制，且对ACE及AGT两个基因多态性进行双位点联合研究，这在国内外的文献中尚未见报道。 目的：本研究通过检测ACE基因插入/缺失(I/D)多态性和AGT基因M235T多态性在中国南方部分汉族人群冠心病患者中的分布特征，探讨两基因多态性在冠心病患者发生CHF中的作用和意义及其与CHF病情严重程度的关系，以期从分子水平探讨CHF发病和转归的机制及特点，为CHF遗传易感基因及高危人群的筛查、识别、防治及临床转归评估提供科学依据。方法： 1．研究对象 对冠心病病人共215人进行病例对照研究。将其中合并慢性心力衰竭者105例作为病例组，其中男性73例，女性32例，年龄(67±12)岁。将研究对象中没有合并CHF者作为对照组，共110例，其中男性75例，女性35例，年龄(66±10)岁。调查所有研究对象的吸烟、高血压、糖尿病及高血脂史，检测空腹血糖及血脂、血红蛋白、肝功能、肾功能。 2．实验方法 采集周围静脉血白细胞，酚/氯仿/异戊醇方法提取基因组DNA，应用聚合酶链反应检测ACE基因I/D多态性，应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性技术检测AGT基因M235T多态性。 3．统计学方法计量资料间比较采用成组t检验或单因素方差分析，频数比较采用x<'2>检验，二项Logistic回归分析冠心病患者发生CHF的独立危险因素。所有计量资料均用x±s表示；相对危险度以优势比(OR)及95﹪置信区间(CI)表示。以P<0.05为差异具有显著性。均应用SPSS15.0 for windows统计软件进行统计学分析。 结果： 1、病例组DD基因型频率显著高于对照组(分别为45.7﹪和23.6﹪，P<0.01)，与非DD型相比，DD型者发生CHF的OR为2.721。同时，D等位基因频率也较对照组高(分别为64.8﹪和43.6﹪，P<0.01)；按性别进行分层分析，男性冠心病合并CHF组DD基因型频率及D等位基因频率均高于其对照组(DD基因型：分别为46.4﹪和24.0﹪；D等位基因：分别为65.2﹪和43.3﹪，P值均<0.01)。与非DD型相比，男性DD型冠心病患者发生CHF的OR为2.739。女性冠心病合并CHF组DD基因型频率与其对照组相比较无统计学差异(分别为44.4﹪和22.8﹪，p=0.096)，但D等位基因频率较其对照组高(分别为63.9﹪和44.3﹪，P=0.012)： 按年龄进行分层分析，中青年病例组DD基因型频率及D等位基因频率均显著高于其对照组(DD基因型：分别为63.3﹪和26.7﹪；D等位基因：分别为73.3﹪和46.7﹪，P值均<0.01)，与非DD型相比，中青年DD型冠心病患者发生CHF的OR为4.750。老年病例组DD基因型频率及D等位基因频率亦高于其对照组(DD基因型：分别为38．7﹪和22.5﹪；D等位基因：分别为61.3﹪和42.5﹪，P值均<0.05)。与非DD型相比，老年DD型冠心病患者发生CHF的OR为2,171。 2、AGT基因TT基因型频率及T等位基因频率在病例组及对照组中的分布均无统计学差异(TT基因型：分别为61.9﹪和49.1﹪；T等位基因：分别为77.1﹪和70.5﹪，P值均>0.05)。 按性别进行分层分析，男性冠心病合并CHF组TT基因型及T等位基因频率较对照组高，但差异无统计学意义(TT基因型：分别为62.3﹪和48.0﹪；T等位基因：分别为78.3﹪和69.3﹪，P值均>0.05)。女性两组间AGT基因型及等位基因频率分布亦无差异(TT基因型：分别为63.9﹪和51.4﹪；T等位基因：分别为76.4﹪和72.9﹪，P值均>0.05)。 按年龄进行分层分析，中青年病例组及对照组TT基因型及T等位基因频率分布无差异(TT基因型：分别为56.7﹪和53.4﹪；T等位基因：分别为73.3﹪和75.0﹪，P值均>0.05)。老年病例组TT基因型及T等位基因频率均较其对照组高，且差异具有统计学意义(TT基因型：分别为64.0﹪和47.5﹪；T等位基因：分别为78.7﹪和68.8﹪，p值均<0.05)，与非TT型相比，TT型冠心病患者发生CHF的OR为1.965。 3、联合ACE及AGT基因多态性分析发现，病例组及对照组中同时具有ACE基因DD型及AGT基因TT型者的频率分别为27.6﹪及14.5﹪，前者高于后者(x<'2>=5.548，P=0.019)。与其他基因型组合相比，具有该联合基因型的冠心病患者发生CHF的OR为2.742。而与非DD非TT型组合者相比，具有该联合基因型者发生CHF的OR为3.790。 4、应用二项Logistic回归分析模型进行多因素分析，结果表明，ACE基因型与冠心病患者发生CHF相关；进一步分析ACE基因与AGT基因间的交互作用表明，ACE和AGT基因在冠心病患者CHF的发生中具有协同作用，以II+MM型为参照，DD+TT基因型发病的OR为5.039，较单基因分析ACE DD型发生CHF的OR(2.721)高。 5、应用单因素方差分析对病例组ACE基因型各亚组间的LVDD均数进行统计分析及比较，结果表明不同ACE基因型其LVDD有差别，L,VDD<,DD>>LVDD<,ID>>LVDD<,II>(P<0.05)；统计各亚组间LVEF的均数并进行单因素方差分析，结果表明各亚组间LVEF无统计学差异(P>0.05)。不同AGT基因型亚组间LVDD及LVEF差别均无统计学意义(P>0.05)。 结论： 在中国南方部分汉族人群的冠心病患者中，ACE I/D、AGT、M235T、多态性与CHF的发生存在如下关联： 1、ACE I/D多态性与冠心病患者发生CHF有关，DD型ACE基因可能是其发病的遗传危险因素。DD型ACE基因与男性冠心病患者发生CHF关系更为密切，在女性冠心病患者中，DD型基因似乎并没有增加CHF发生的风险。中青年及老年冠心病患者发生CHF均与DD基因相关，但与老年冠心病患者相比，中青年患者如果携带DD型ACE基因，发生CHF的风险更高。 2、TT型AGT基因可能参与老年冠心病患者CHF的发病。 3、DD型ACE基因及TT型AGT基因在冠心病患者CHF的发病中起协同作用。 4、ACE基因多态性与冠心病合并CHF的病情严重程度相关，DD基因型预示CHF存在不良转归；AGT基因多态性与CHF病情严重程度无明显相关。

目录

文摘

英文文摘

第1章引言

第2章对象与方法

第3章实验材料

第4章结果

第5章讨论

第6章结论

参考文献

英文缩略词

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已发表文献综述全文　肾素-血管紧张素系统及交感神经系统基因多态性与慢性心力衰竭个体化治疗

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