骨髓基质干细胞种植入去细胞同种异体神经构建猕猴组织工程化神经的实验研究

摘要

本实验将体外分离培养的猕猴BMSCs与去细胞同种异体神经支架复合，并移植入猕猴桡神经缺损处，检测BMSCs在体内的分化、迁徙及其对周围神经再生的作用，阐明BMSCs对修复猕猴周围神经缺损的重要意义。 第一章：猕猴骨髓基质干细胞体内分化为类雪旺细胞及示踪研究 1.方法: 1.实验动物： 6只3岁雄性猕猴(n=12)，随机分为两组：实验组(BMSCs-1aden组，n=6)与对照组(rlone—cell—laden组，n=6)。 2.BMSCs的分离培养、鉴定及BrdU标记： 3.化学萃取猕猴腓总神经、自体BMSCs与去细胞同种异体神经体外复合并植入体内： 4.术后8周行神经电生理检测及神经移植物的组织形态学及免疫荧光检测。 结论： 1.自体骨髓基质干细胞植入猕猴周围神经缺损后，仍可存留于神经移植物内并保持活性；骨髓基质干细胞可在体内诱导分化为类雪旺细胞并促进神经再生。 2.骨髓基质干细胞与去细胞同种异体神经复合物可提供比单纯去细胞同种异体神经更适宜周围神经再生的环境。 第二章：骨髓基质干细胞与去细胞同种异体神经复合修复猕猴桡神经2.5cm缺损的实验研究 方法: 1.实验动物 15只3岁雄性猕猴(n=30)，体重3.2Kg至4.0Kg，随机分为5组，每组6例：BMSCs—laden组;SCs—laden组;autograft组;non—cell-1aden;negative control组。 2.种子细胞(BMSCs，SCs)的培养 BMSCs分离与培养方法如第一章所述。 3.化学萃取腓总神经及自体BMSCs(或SCs)与去细胞同种异体神经体外复合并植入体内切取猕猴腓总神经并将其切为3cm长片段进行萃取，步骤如第一章所述。萃取后将每段神经修剪为2.5am长，放入PBS液中4℃保存。 4.术后5个月，观察神经功能恢复情况，行神经电牛理检测及神经移植物、肌肉组织的形态学检测。 结论: 自体骨髓基质干细胞与去细胞同种异体神经复合修复长段(2.5cm)猕猴周围神经缺损，可取得优于单纯去细胞异体神经移植并且与自体神经及SCs与去细胞异体神经复合物移植相当的效果。

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文摘

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引 言

第一章猕猴骨髓基质干细胞体内分化为类雪旺细胞及示踪研究

前 言

1.材料与方法

2.结果

3.讨论

4.结论

第二章骨髓基质干细胞与去细胞同种异体神经复合修复猕猴桡神经2.5cm缺损的实验研究

前 言

1.材料与方法

2.结果

3.讨论

4.结论

参考文献

附图1

附图2

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