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加味黄连解毒汤对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞的影响

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前言

第一章加味黄连解毒汤对肿瘤细胞抑制的作用

第二章加味黄连解毒汤对细胞凋亡的影响

第三章加味黄连解毒汤对细胞周期的影响

第四章加味黄连解毒汤对骨髓侧群细胞的影响

全文结论

不足之处和展望

参考文献

致谢

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摘要

目的: 研究属于中医清热解毒类药物的加味黄连解毒汤(Modified HLJDT)对人多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞的影响,并探讨对MM细胞中具干细胞特性的侧群细胞的影响。 方法: 用加味黄连解毒汤的甲醇提取物,以二甲基亚砜(DMSO)溶解后稀释成实验所需的药物浓度,以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基常规培养RPMI8226细胞,选处于指数生长期的细胞种在孔板内,分别以不同浓度的加味黄连解毒汤干预24小时后,应用倒置显微镜观察多发性骨髓瘤RPMI8226细胞形态和数量的变化;应用MTS染料检测加味黄连解毒汤作用于多发性骨髓瘤细胞RPMI8226后24小时和36小时的生长抑制情况;应用流式细胞仪检测加味黄连解毒汤作用于多发性骨髓瘤RPMI8226细胞24小时后细胞的凋亡情况;采用流式细胞术测定药物作用于多发性骨髓瘤RPMI8226细胞24小时后细胞DNA增殖和细胞周期的变化;应用流式细胞仪检测药物对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞中具干细胞特性的侧群细胞(SP)的影响。 结果: 与对照组相比,8μg/ml-500μg/ml加味黄连解毒汤能抑制人多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞增殖,并呈现明显的时间和剂量相关性(P<0.05);10μg/ml-200μg/ml能诱导肿瘤细胞凋亡,呈现明显的剂量相关性(P<0.05);125μg/ml-500μg/ml抑制肿瘤细胞DNA合成进而使肿瘤细胞的生长阻滞在G1/G0期,呈现明显的剂量相关性(P<0.05);8μg/ml-500μg/ml能降低细胞中能表现干细胞特性的侧群细胞(SP)的比例,并呈现明显的剂量相关性(P<0.05)。 结论: 加味黄连解毒汤能抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡、阻滞肿瘤细胞DNA复制,将肿瘤细胞生长阻滞在G0/G1期、降低能表现干细胞特性的侧群细胞的比例(SP%),说明加味黄连解毒汤对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞有明显的抑制作用,对具肿瘤干细胞特性的侧群细胞亦有抑制和杀伤作用。

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