生物材料中三甲基氯化锡(TMT)测定方法研究

摘要

研究目的:
　　 1)建立和优化一种灵敏度和准确度高、精密度好、操作简单、易于推广应用,适合生物材料中三甲基氯化锡检测的方法；
　　 2)采用研制出来的检测方法对PVC塑料制品厂TMT接触人员的尿样和血样进行检测,了解职业接触人员体内TMT的水平；
　　 3)为制定工作场所空气TMT的职业接触限值(OELs)和生物接触指数(BEIs)提供配套的检测方法；
　　 研究方法:
　　 本研究拟采用衍生化气相色谱-质谱联用检测法对生物材料中TMT进行测定,并对实验条件、样本及处理方法等进行选择,对方法的性能指标、方法的现场应用等进行研究,具体如下:
　　 1)实验条件的选择仪器测定条件:对色谱柱、载气流速、柱子程序升温、分流比等进行正交优化试验,选择出最佳的色谱测定条件。对质谱的离子源温度、电离电压、质量扫描范围、扫描模式、定量离子等参数进行试验,选择出最佳的质谱测定条件。
　　 样本的选择:对班前尿和班后尿进行检测,选择合适的尿样；对TMT在血液各成分中的分布进行检测,选择合适的血液检材(全血或血浆)；对TMT在体内各器官的分布进行检测,选择出合适的器官样本。
　　 处理方法的选择:选择不同的萃取溶剂和衍生化条件进行试验,选择出合适的萃取剂和衍生条件(衍生剂加入量、衍生化时间、衍生体系酸碱度、衍生化方式)等样品处理方法。
　　 2)方法性能指标试验按照GB(Z)T210.5-2008[10]《职业卫生标准制定指南,第5部分:生物材料中化学物质测定方法》(以下称《标准制定指南》)的要求,对方法的标准曲线绘制、线性范围、最低检出浓度、精密度、准确度、干扰情况、样品稳定性等性能指标进行试验,确定方法的检测能力和检测质量。
　　 3)方法的现场应用应用研制出的生物材料中TMT检测方法对塑料制品厂的职业接触人员尿样和血样进行测定,检验方法的实用性和准确性。
　　 研究结果:
　　 通过研究,选择出了最佳的仪器分析条件、合适的检测样本和样品处理方法,对方法的性能指标也进行了研究,结果如下:
　　 1)最佳的仪器分析条件选择规格为60 mx0.32 mm×1.0μm的HP-5MS色谱柱；气化室温度设定为250℃；程序升温过程为:初温50℃,以20℃/min升到200℃,保持1min；载气(He)流量为:2.0mL/min；分流比为5:1的气相色谱条件；设定全扫描质量范围为:15～300aum；选择离子扫描(SIM)的质量峰为:定量用165 m/z,鉴定用151、163和194 m/z的质谱条件,在该优化的条件下被测物有较高的灵敏度,与共存的干扰物和样品基体能较好分离。
　　 2)合适的样品通过本次研究发现,班前尿和班后尿中均能检测出TMT,说明尿样的采集没的严格的时间限制,这有助于现场尿样的采集和暴露的评价；由于血液中TMT主要分布在红细胞中,因此要选择全血样品作为检材；TMT在体内能分布在心、肝、脾、肺、肾、胃、脑等器官中,其中以肺、肾、脾、肝等器官为主,这有助于对器官功能指标的分析与评价。
　　 3)最佳的样品处理方法选择乙腈作为血样和器官样品的萃取剂和选择四乙基硼酸钠(NaBEt4)作为衍生剂,确定缓冲液pH值为4.0±0.2、加入衍生剂用量为0.2mL、衍生化时间为30min和采用衍生剂与正己烷萃取剂同时加入的一体化衍生萃取方式可以得到较好的衍生化效果。
　　 4)方法的性能指标结果本方法采用标准曲线外标法进行定量检测,TMT的含量在0.0259μg～2.590μg范围内线性良好,相关系数为r=0.9998。尿样的最低检出浓度为0.0014μg/mL,血样为0.009μg/mL,器官样为0.004mg/kg。样品的检测精密度良好,尿样测定的平均相对标准差(RSD)为1.9％、血样为3.2％、器官为3.6％。样品的准确度高,尿样和器官样品的平均加标回收率为103.2％和94.2％、血样为77.1％。常见的干扰物和样品中的基体成分在本实验条件下不干扰测定,样品在4℃下至少可保存14天。
　　 5)方法的实际应用情况应用本方法对某PVC塑料制品厂52名职业接触人员的尿样和46名工人的血样进行测定,尿样中TMT的浓度在0.0074μg/mL～0.3241μg/mL之间,其中以制粒工种浓度最高,平均浓度为0.1730μg/mL,押出工种最低平均浓度为0.0520μg/mL。工人血样中TMT的浓度在0.0109μg/ML～0.2638μg/mL之间,其中以制粒工种浓度最高,平均浓度为0.0925μg/mL,押出工种最低平均浓度为0.0210μg/mL,工人尿样和血样中TMT的浓度与其实际接触情况相符。
　　 结论:
　　 1)通过研究表明本方法灵敏度高、准确性高、精密度好、操作简单、成本低,易于推广应用,职业接触人员的尿样和血样中均能检出TMT,表明该方法适合于职业接触人员生物材料中TMT的测定。
　　 2)采用该方法对某PVC塑料制品厂制粒、加料、破碎、压出等工种的工人进行尿样和血样检测,制粒工种工人TMT的检测水平最高,押出工种最低,结果与实际接触情况相符。
　　 3)本检测方法可以作为制定OELs和EBIs的配套检测方法。
　　 4)本方法的各项性能指标均能满足《标准制定指南》的要求,符合作为国家标准检测方法向全国推广使用要求。

目录

文摘

英文文摘

第1章 前言

1.1 研究背景

1.2 国内外TMT检测研究现状

1.3 研究意义

第2章 材料和方法

2.1 仪器与耗材

2.2 试剂

2.3 主要试剂配制

2.4 实验方法

第3章 结果

3.1 测定条件优化

3.2 方法性能指标

3.4 现场应用

第4章 讨论

4.1 测定条件优化

4.2 本研究方法性能指标

4.3 本研究方法的实用性

第5章 结论

参考文献

附录

在读期间发表的论文笔申请的课题

综述

参考文献

致谢