人乳头瘤病毒感染与DAN异常甲基化在食管鳞状细胞癌中的研究

摘要

背景和目的：
　　人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染可能是食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）的危险因素之一。而在食管鳞癌病人中，HPV的感染是否与 DNA异常甲基化存在相关关系目前仍不清楚。本实验拟研究潮汕地区食管鳞状细胞癌病人中人乳头瘤病毒及其亚型HPV16、HPV18的感染情况和该病毒感染对DNA异常甲基的影响。
　　材料和方法：
　　本实验研究的对象为2013年至2014年间入院汕头大学医学院附属肿瘤并经病理确诊的食管鳞状细胞癌肿瘤患者，共包括了88例食管鳞癌患者的手术切除标本，其中79例肿瘤组织标本有对应的癌旁正常组织。实验采用了巢式PCR的方法对人乳头瘤病毒HPV及其亚型HPV16和HPV18的感染情况进行了测定。同对收集的这88例食管癌肿瘤病人的癌组织及对应的79例癌旁正常组织进行了肿瘤相关基因/位点甲基化状态的检测，采用的是甲基化特异性PCR的方法。本课题进行甲基化研究的基因/位点包括了MINT1、MINT2、MINT25、MLH1、RASSF1A和MGMT。
　　结果：
　　人乳头瘤病毒HPV通用引物PGMY09/11联合通用引物GP5+/6+巢式PCR方法检测出该组食管鳞癌肿瘤病人中有55例存在HPV感染阳性，阳性感染率为62.5％。然后对这些感染阳性的患者进一步进行HPV16、HPV18亚型感染情况的检测，结果显示，有25例病人存在HPV16亚型的感染，有6例病人存在HPV18亚型的感染，总感染率分别为28.14%和6.82%；在这些进行亚型检测的病人中，有3例病人出现了HPV16和HPV18共同感染的情况。在关于肿瘤相关基因甲基化的研究，肿瘤相关基因MINT1、MINT2、MINT25、MLH1、RASSF1A和MGMT在食管鳞癌肿瘤组织中的甲基化阳性率分别为15.91%、20.45%、6.82%、20.45%、13.64%和15.91%，而对应的在79例癌旁正常组织中其甲基化阳性率则降为0、3.80%、1.27%、3.80%、8.86%和8.86%。其中MINT2、MINT25、MGMT和RASSF1A的甲基化阳性率在食管鳞癌和癌旁组织中存在有统计学差异，癌组织的甲基化阳性率高于其对应的癌旁组织。根据这组肿瘤相关基因的甲基化改变情况，将这些肿瘤病人分为甲基化改变-阴性、低、高组。对比各组HPV及其亚型的感染情况可发现，HPV16亚型的感染与DNA异常甲基化增高有关。
　　结论：
　　食管鳞癌病人中异常的甲基化改变与人乳头瘤病毒 HPV感染有关，但是不同亚型的人乳头瘤病毒其影响作用不一，本研究提示HPV16感染可能与食管鳞癌病人中DNA异常甲基化增高有关。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

缩略词

目录

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 主要仪器设备

2.3 实验试剂

2.4 实验方法

2.5 统计学分析

第三章 实验结果

3.1 提取DNA 样品的质量控制

3.2 食管鳞癌病人临床资料分析

3.3 人乳头瘤病毒（HPV）在潮汕食管癌病人中的感染情况

3.4 肿瘤相关基因甲基化状态在食管癌及癌旁组织中的比较

3.5 肿瘤相关基因甲基化状态与食管癌病人临床病理资料的关系

3.6 人乳头瘤病毒HPV感染与肿瘤相关基因甲基化的关系

3.7人乳头瘤病毒HPV感染与DNA异常甲基化在ESCC中的关系

第四章 讨论

结论:

参考文献

附录

发表论文情况

致谢

个人简历