自拟枳椇子汤预防性解酒保肝作用的研究

摘要

目的：
　　通过动物实验方法，建立急性酒精性中毒小鼠模型，探讨自拟枳椇子汤对急性酒精性中毒小鼠的预防性解酒作用及其肝脏保护机制；通过分子对接模拟方法，探讨枳椇子汤解酒保肝的作用靶点及药效物质基础，为治疗急性酒精性中毒的临床用药提供实验依据。
　　方法：
　　⑴取30只小鼠随机分成3组，一次性给酒，灌胃剂量为0.14ml/10g、0.16ml/10g、0.18 ml/10g。记录算出小鼠的醉酒耐受时间、醒酒时间、醉酒率和死亡率。⑵取60只小鼠随机分成6组：空白组、模型组、阳性对照组（葛花解酲汤组）、枳椇子汤高、中、低剂量组，先给药后给酒，记录小鼠醉酒耐受时间、醒酒时间。⑶取40只小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、枳椇子汤组，造模3h后取小鼠肝组织制备肝匀浆，按ADH试剂盒说明书的方法检测ADH活性。⑷取40只小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和枳椇子汤组。小鼠连续造模3天后摘眼球取血，按AST、ALT试剂盒说明书测量小鼠血中AST和ALT的含量。⑸取63只小鼠随机分为0.5h、1.5h、3h这3个时间段组，再分别分为模型组、阳性对照组、枳椇子汤组。造模后在三个时间段分别取血，用气相色谱法检测小鼠血乙醇浓度并对其方法学进行研究。⑹构建枳椇子汤化学成分分子数据库，通过Atoudocking vina1.1.2分子对接平台，选取ADH、ALDH、COX-2和OPRM1这4个靶点蛋白，对枳椇子汤中枳椇子、茯苓、砂仁、甘草的化学成分进行虚拟筛选。
　　结果：
　　①选用0.16ml/10g的灌胃剂量作为本实验最佳的致醉量，因小鼠的醉酒耐受时间和醒酒时间相对较短，致醉率和24h生存率均为100％，方便试验研究。②与模型组比较，枳椇子汤高、中剂量组和葛花解酲汤组预防性给药均可明显延长小鼠的醉酒耐受时间，缩短醒酒时间，具有显著性差异（P<0.01）。③与空白组比较，模型组、葛花解酲汤组和枳椇子汤组的ADH值均增高，均具有显著性差异（P<0.01）。与模型组比较，葛花解酲汤组和枳椇子汤组的ADH亦增高，具有显著性差异（P<0.01）。④与空白组比较，模型组小鼠血清AST、ALT活性明显升高，具有显著性差异(P<0.01)；与模型组比较，葛花解酲汤组和枳椇子汤组具有显著性差异(P<0.01)；枳椇子汤组与葛花解酲汤组两组比较无显著性差异（P>0.05）。⑤与模型组比较，葛花解酲汤组和枳椇子汤组在0.5h、1.5h、3h这三个时间段的血乙醇浓度明显降低，具有显著性差异P(<0.01)。直接气相色谱法满足检测要求。⑥枳椇子汤有206个药效成分能作用于4个不同的靶点蛋白，其中能作用ADH有114个，作用ALDH有60个，作用COX-2有15个，作用OPRM1有109个，69个具有多靶向协同作用。
　　结论：
　　枳椇子汤对急性酒精性中毒小鼠有预防性解酒保肝作用，通过升高肝组织的ADH活性，降低血乙醇浓度和肝组织的AST、ALT活性起到其预防性解酒保肝作用；分子对接模拟筛选出206个解酒保肝药效物质基础，其中有69个起多靶向协同作用。

目录

声明

缩略词表

前言

1.1 解酒研究的必要性

1.2 自拟枳椇子汤的组方分析

第一章 小白鼠致醉用酒量的摸索

1.1 引言

1.2 实验材料

1.3 实验方法

1.4 实验结果

1.5 讨论

第二章 枳椇子汤对预防性给药急性酒精性中毒小鼠的解酒研究

2.1引言

2.2实验材料

2.3实验方法

2.4 实验结果

2.5 讨论

2.6 小结

第三章 枳椇子汤对预防性给药急性酒精性中毒小鼠ADH的影响

3.1前言

3.2实验材料

3.3实验方法

3.4实验结果

3.5 讨论

3.6 小结

第四章 枳椇子汤对预防性给药急性酒精性中毒小鼠AST和ALT的影响

4.1前言

4.2实验材料

4.3实验方法

4.4实验结果

4.5 讨论

4.6 小结

第五章 气相色谱法检测急性酒精性中毒小鼠血乙醇浓度的方法学研究

5.1 引言

5.2材料

5.3实验方法

5.4 结果

5.5讨论

5.6小结

第六章 用分子对接方法初步探讨枳椇子汤的解酒保肝药效物质基础

6.1 前言

6.2实验材料

6.3实验方法

6.4结果

6.5讨论

6.6小结

结语与展望

参考文献

综述

个人简历

致谢