影响卵母细胞透明带发育的相关因素探究

摘要

第一部分卵母细胞透明带发育不良的相关临床因素分析
　　目的：
　　分析卵母细胞透明带发育不良的相关临床因素。
　　方法：
　　回顾性分析2015年10月至2016年7月于北京大学深圳医院生殖医学科行IVF治疗的患者共569个周期的临床资料，按是否出现透明带发育不良分为两组：出现卵母细胞透明带发育不良为A组，217个周期；卵母细胞正常为B组，352个周期，比较两组基本资料。再按年龄和卵巢功能分组来比较促排卵、获卵与受精情况，分析临床结局。用两样本t检验、卡方检验对数据进行统计学分析。P<0.05为差异具有统计学意义。
　　结果：
　　A组与B组相比，年龄[(35.4±5.6)岁 vs.(34.4±5.9)岁]、基础FSH[(9.37±5.37)U/L vs.(8.52±4.00)U/L]、AMH[(3.76±5.7)ng/ml vs.(4.68±4.12)ng/ml]的差异均有统计学意义（P＜0.05），而年龄的OR值为1.036，95％CI（1.004-1.070）（P＜0.05）。再按年龄及卵巢储备功能分组后，35≤&<40岁卵巢储备良好组，A组与B组相比，Gn天数[(11.7±2.8)天 vs.(10.3±3.4)天]，Gn用量[(44.76±16.90)U/L vs.(34.22±17.44)U/L]，MII卵数[(6.0±4.1)个vs.(9.0±6.1)个]；≥40岁卵巢储备良好组， A组与B组相比，Gn天数[(11.4±3.9)天vs.(9.4±3.4)天]，Gn用量[(49.24±27.51)U/L vs.(33.96±18.08)U/L]，MII卵数[(3.9±2.3)个vs.(5.6±4.7)个]，优质胚胎率（19.15%vs.40.88%）的差异均有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论：
　　年龄是影响卵母细胞透明带发育的独立暴露危险因素，随着年龄增大（≥35岁时），当患者卵巢储备良好时，Gn用量越多、时间越长，越容易引起透明带发育不良；且透明带发育不良的出现导致该组成熟卵数显著下降，影响促排卵效率；而当年龄≥40岁卵巢储备良好时，透明带发育不良组还会出现优质胚胎率下降。
　　第二部分颗粒细胞透明带蛋白的表达与卵母细胞质量的关系
　　目的：
　　探究卵冠丘颗粒细胞透明带蛋白ZP1、ZP2、ZP3与患者自身条件、卵母细胞成熟度及其后续受精与发育潜力的关系。
　　方法：
　　纳入2016年11月至2017年3月于北京大学深圳医院生殖医学科行卵母细胞浆单精子注射（ICSI）助孕治疗的患者，取正常卵母细胞的卵冠丘颗粒细胞，以q-PCR的方法检测颗粒细胞中透明带蛋白ZP1、ZP2、ZP3的表达，同时收集患者的一般情况与其获卵及受精情况。以两种方式进行分组，①按年龄把患者分为三组：<30岁组、30≤&<35岁组、≥35岁组；②按促排卵方案把患者分为三组：常规长方案组、拮抗剂方案组、微刺激方案组，用单因素方差分析比较各组ZP1、ZP2、ZP3的表达差异。取消分组后，用单因素或多因素线性相关分析各指标之间的相关关系，P<0.05认为有统计学意义。
　　结果：
　　卵冠丘颗粒细胞ZP1、ZP2、ZP3的表达与患者的年龄、促排卵方案均无相关性，而ZP3与患者卵巢储备（AMH）呈线性正相关关系：ZP3=-0.025+0.023×AMH，患者的获卵数与年龄、AMH、ZP3均有线性相关关系：获卵数=23.453-0.522×年龄+0.854×AMH+12.055×ZP3；ZP3作为影响卵母细胞成熟度的重要因子，与MII卵数也呈线性正相关关系：MII卵数=8.584+24.710×ZP3；同时，ZP3作为初级精子受体，与2PN受精数亦呈线性正相关关系：2PN受精数=5.007+24.710×ZP3；ZP3与MII卵率及2PN受精率也有非线性相关的关系。ZP2作为次级精子受体，它的水解与防止多精子受精有关，结果也证实2PN受精率与 ZP2呈线性负相关关系：2PN受精率=1.148-6.015×ZP2。虽然ZP3与2PN卵裂数及可用胚胎数呈线性正相关关系，但这可能与其和2PN受精数呈正相关有关。而ZP1对卵母细胞成熟、受精则均无关系，ZP1、ZP2、ZP3与胚胎正常卵裂及发育潜力的关系还暂不能明确。
　　结论：
　　卵巢储备功能越好（AMH越高），卵冠丘颗粒细胞中ZP3的表达越多，同时获卵数、MII卵数、MII卵率、2PN受精数、2PN受精率都会随着ZP3的表达增多而增加，而2PN受精率则会随着ZP2的表达增多而下降。卵母细胞成熟度及其正常受精与ZP3的表达呈正相关，卵母细胞正常受精率与ZP2的表达呈负相关。

目录

声明

中英文缩写对照

前言

第一部分 卵母细胞透明带发育不良的相关临床因素分析

【材料与方法】

一、研究对象及分组

二、观察指标

三、统计学分析

【结果】

一、一般资料比较

二、年龄、AMH、基础FSH与卵母细胞透明带发育不良的多因素Logistic逐步回归分析

三、促排卵、获卵及受精情况、临床结局比较

【讨论】

【小结】

第二部分 卵丘颗粒细胞透明带蛋白的表达与卵母细胞质量的关系

【材料与方法】

一、材料

二、 研究对象及分组

三、实验方法

四、统计学方法

【结果】

一、 RNA检测结果及PCR检测结果

二、按年龄分组后三组患者ZP1、ZP2、ZP3的表达差异

三、按促排卵方案分组后三组患者ZP1、ZP2、ZP3的表达差异

四、患者一般情况与ZP1、ZP2、ZP3的多元线性回归分析

五、ZP1、ZP2、ZP3与获卵及受精情况的多元线性回归分析

【讨论】

【小结】

结论

参考文献

附录1综述:高龄对卵母细胞质量的影响

附录2在读期间发表文章

致谢

个人简历