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前言
材料和方法
1.1 细胞来源
1.2 主要试剂和材料
1.3 主要仪器
1.4 主要试剂溶液的配制
2.1 细胞培养
2.2 CCK-8法测定细胞增殖活性
2.3 β-catenin/TCF/LEF的转录活性的测定
2.4 真核表达载体pSilencer2.1-U6-COX-2 shRNA的构建
2.5 稳定表达shRNA的Hep3B细胞的筛选
2.6 COX-2 shRNA对Hep3B细胞抗增殖作用的检测
2.7 逆转录聚合酶链反应分析细胞mRNA表达水平
2.8 细胞内总蛋白提取和蛋白含量测定
2.9 免疫印迹检测细胞内蛋白水平
3 数据处理
结果
1 肝细胞癌Hep3B细胞COX-2 mRNA表达水平
2 肝细胞癌Hep3B细胞EP受体mRNA表达水平
3 PGE2对Hep3B细胞增殖活性的影响
4 EP2和EP3/EP4受体激动剂对Hep3B细胞增殖活性的影响
5 尼美舒利对Hep3B细胞增殖的抑制作用
6 PGE2对尼美舒利抗增殖作用的影响
7 COX-2 siRNA对Hep3B细胞增殖活性的影响
8 质粒pSilencer2.1-U6-COX-2 shRNA的构建和鉴定
9 COX-2shRNA对Hep3B细胞增殖活性的影响
10 PGE2对Hep3B细胞β-catenin和磷酸化的β-catenin水平的影响
11 COX-2shRNA对Hep3B细胞β-catenin和磷酸化的β-catenin水平的影响
12 PGE2和butaprost对Hep3B细胞β-catenin/TCF/LEF转录活性的影响
13 COX-2shRNA对Hep3B细胞β-catenin/TCF/LEF转录活性的影响
14 尼美舒利对Hep3B细胞β-catenin/TCF/LEF 转录活性的影响
15 β-catenin siRNA对PGE2促Hep3B细胞增殖作用的影响
16 PGE2对磷酸化GSK-3β和GSK-3β蛋白水平的影响
17 PGE2对磷酸化Akt和Akt蛋白水平的影响
18 PI3-K抑制剂WM对PGE2作用的影响
讨论
结论
参考文献
攻读学位期间与本课题相关的成果
缩略词表
致谢
统计学审稿证明