大黄对高氧致新生鼠支气管肺发育不良的保护作用

摘要

支气管肺发育不良(brochopulmonary dysplasia，BPD)是由Northway等首次命名的常见于早产儿的慢性肺部疾病之一。其辅助用氧时间长，病死率高，存活者常遗留不同程度的呼吸系统后遗症。目前认为，在BPD的发生发展中炎症反应、氧化应激及细胞凋亡均扮演十分重要的角色。大黄为中国传统中草药之一，具有广泛的药理活性，如抑菌、消炎、抗氧化、抗凋亡、抗肿瘤、降糖以及护肝等作用。近来研究多揭示的是大黄对急性肺损伤的保护作用，其对慢性肺损伤如BPD是否有保护作用尚未见相关报道。
　　研究目的:
　　1.探讨大黄是否可以通过抑制肺组织中炎症及氧化应激反应，发挥保护BPD高氧肺损伤的作用。
　　2.探讨大黄对高氧致肺组织细胞凋亡的干预作用及其可能的作用机制。
　　研究方法:
　　1.生后4天SD大鼠随机分成4组（每组16只）:空气+生理盐水组、空气+大黄组、高氧+生理盐水组、高氧+大黄组。前两组暴露于空气中，后两组暴露于60％氧浓度中构建BPD模型。大黄干预组每天给予大黄600mg/kg灌胃，对照组给予等量生理盐水灌胃。
　　2.各组新生鼠于生后14、21天随机抽取8只，麻醉后处死并取肺组织。HE染色检测肺组织形态学改变。
　　3.Western blot检测TNF-a、IL-6及Fas蛋白表达。
　　4.RT-PCR法检测TNF-a、IL-6mRNA表达。
　　5.试剂盒检测MDA水平及SOD活性。
　　6.TUNEL法检测肺组织细胞凋亡。
　　7.分光光度计检测caspase8和caspase3酶活性。
　　研究结果:
　　1.高氧+生理盐水组大鼠肺组织出现肺泡数目减少、体积增大、结构简单化等发育受阻的表现，并随高氧暴露时间的延长损伤加重。高氧+大黄组，肺组织病理改变明显减轻。
　　2.于大鼠生后14、21天，高氧+生理盐水组与空气+生理盐水组相比，肺组织中SOD活性降低（P均＜0.01），MDA水平、TNF-a mRNA及蛋白水平、IL-6mRNA及蛋白水平均升高（P均＜0.05）。高氧暴露行大黄干预后，与高氧+生理盐水组相比，肺组织中SOD活性升高（P均＜0.01），MDA水平(P＜0.05、P＜0.01)、TNF-a mRNA(P均＜0.01)及蛋白（P均＜0.01）水平、IL-6mRNA(P＜0.05、P＜0.01)及蛋白水平（P＜0.05、P＜0.01）均降低。
　　3.与空气+生理盐水组比较，高氧+生理盐水组于大鼠生后14、21天肺组织细胞凋亡指数、Fas蛋白表达量、caspase8和caspase3酶活性均显著增加（P均＜0.001）。高氧+大黄组与相应时间点的高氧+生理盐水组比较，肺组织凋亡细胞、Fas蛋白表达量、caspase8和caspase3酶活性均明显降低（P均＜0.001）。
　　研究结论:
　　1.大黄可能通过抑制炎症和氧化应激反应对高氧致新生鼠支气管肺发育不良发挥保护作用。
　　2.大黄可通过减少肺组织细胞凋亡减轻BPD的高氧肺损伤，其机制可能涉及Fas凋亡途径。

目录

摘要

前言

第一章 大黄对新生鼠支气管肺发育不良的干预作用

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第二章 大黄对高氧暴露新生鼠肺组织细胞凋亡的干预作用

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

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攻读硕士学位期间发表论文

致谢

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