硫辛酸通过调控能量代谢和氧化应激改善少弱精子症大鼠生殖功能的机制研究

摘要

近年来，不育症发病率逐年升高，全球约15％的育龄夫妇结婚1年内不能怀孕而需干预治疗，其中男性因素约占50％。体内本身所具有的抗氧化剂由于其安全性较好、不良反应少、疗效确切等特点，在少弱精子症治疗方面具有一定的优势。硫辛酸(LA)是一种天然的强效抗氧化剂，最近研究表明，LA可用于男性不育的治疗，能够改善特发性弱精子症患者精液质量，增强精液抗氧化能力等。LA在治疗少弱精子症相关的男性不育有着良好的发展前景。
　　目的：研究LA通过调控能量代谢和氧化应激改善奥硝唑(ORN)所致少弱精子症大鼠生殖功能的机制。
　　方法：
　　取70只SD大鼠，体重（230±20）g，随机分成7组，每组10只，分别为：A组：1ml0.5％CMC-Na+1ml橄榄油;B组：400mg/kgORN+1ml橄榄油;C组：400mg/kg ORN+50mg/kg LA;D组：400mg/kg ORN+100mg/kg LA;E组：800mg/kg ORN+1ml橄榄油;F组：800mg/kg ORN+50mg/kgLA;G组：800mg/kg ORN+100mg/kg LA。连续给药20d，称重，腹腔麻醉，取一侧附睾尾检测精子浓度和活力，另一侧附睾、睾丸做组织形态学观察。取70只SD大鼠，体重230±20g，处置方法同上，心脏取血，分离血清检测T、LH、FSH、INHB水平。取睾丸、附睾，检测睾丸ACP、AKP、LDH、SDH活性，附睾α-葡糖苷酶、LC含量、OCTN2蛋白表达水平，睾丸、附睾SOD、CAT、GSH-Px活性、MDA含量、TAC及Nrf2蛋白表达水平。
　　结果：
　　1.与A组相比，E组大鼠体重增量、睾丸、附睾脏器指数明显下降（P均＜0.01）;与E组相比，F组大鼠附睾及G组大鼠体重增量、睾丸、附睾脏器指数明显增加(P＜0.05或P＜0.01)，精囊脏器指数各组之间并无明显差异。
　　2.与A组相比，B组大鼠精子活力及E组大鼠精子计数、活力明显降低（P均＜0.01），B、C、D组大鼠精子计数并无明显差异;与B组相比，E组大鼠精子计数、活力明显降低(P＜0.01)，C、D组大鼠精子活力明显上升（P均＜0.01）;与E组相比，F、G组大鼠精子计数、活力明显增加(P＜0.05或P＜0.01);与F组相比，G组大鼠精子活力明显上升(P＜0.01)。
　　3.A、B、C、D组大鼠睾丸、附睾组织形态学无明显改变，E组大鼠睾丸、附睾可见组织形态学损伤改变，F、G组大鼠睾丸、附睾组织形态学改变较E组有明显改善。
　　4.与A组相比，B组大鼠血清INHB水平明显降低(P＜0.05)，E组大鼠血清T、INHB水平明显降低及FSH、LH水平升高(P均＜0.01);与E组相比，F组大鼠血清FSH水平明显降低（P＜0.01），G组大鼠T、FSH、LH、INBH水平均明显改善(P＜0.05或P＜0.01);与F组相比，G组大鼠血清FSH、LH水平明显降低(P＜0.05)。
　　5.与A组相比，B组大鼠睾丸ACP、SDH活性明显降低（P均＜0.05），E组大鼠睾丸ACP、AKP、LDH、SDH活性明显降低（P均＜0.01）。与E组相比，F组ACP活性明显增高(P＜0.01)，G组大鼠睾丸ACP、AKP、LDH、SDH活性明显改善(P＜0.05或P＜0.01)。
　　6.与A组相比，B、E组附睾α-葡糖苷酶、LC含量、OCTN2蛋白表达量明显降低(P＜0.01或P＜0.05)。与B组相比，C组大鼠附睾α-葡糖苷酶含量明显升高(P＜0.05)，D组大鼠各指标明显升高(P＜0.05或P＜0.01)。与E组相比，F、G组大鼠附睾α-葡糖苷酶、LC含量、OCTN2蛋白表达量均明显改善(P＜0.01或P＜0.05)。
　　7.与A组相比，B组睾丸SOD、GSH-Px活性明显下降（P均＜0.05），B组附睾、E组睾丸及附睾各项氧化-抗氧化指标均有显著差异(P＜0.05或P＜0.01)。与B组相比，C组附睾SOD、GSH-Px活性及TAC明显升高(P＜0.05或P＜0.01);D组睾丸SOD、附睾SOD、GSH-Px活性、TAC、Nrf2蛋白表达明显升高(P＜0.05或P＜0.01)。与E组相比，F组睾丸GSH-Px活性、TAC、Nrf2蛋白表达量明显升高（P＜0.01或P＜0.05），MDA含量明显降低（P＜0.05）;G组睾丸各项氧化-抗氧化指标均明显改善（P均＜0.01）;F组附睾SOD、CAT活性明显升高（P均＜0.05），MDA含量明显降低(P＜0.01);G组附睾各项氧化-抗氧化指标明显改善(P＜0.05或P＜0.01)。
　　结论：
　　LA能够通过调控能量代谢和氧化应激改善ORN所致少弱精子症大鼠生殖功能，可作为少弱精子症治疗的一个良好选择。

目录

摘要

第一章 前言

第一节 氧化应激损伤雄性生殖能力

第二节 能量代谢与雄性生殖

第三节 奥硝唑(ornidazole，ORN)与大鼠少弱精子症

第四节 硫辛酸(lipoic acid，LA)与男性生殖

第二章 LA对ORN所致少弱精子症大鼠精子质量的影响

第一节 研究目的

第二节 实验材料与方法

第三节 实验结果

第三章 LA对ORN所致少弱精子症大鼠睾丸、附睾组织形态学的影响

第一节 研究目的

第二节 实验材料与方法

第三节 实验结果

第四章 LA对ORN所致少弱精子症大鼠血清T、LH、FSH、INHB水平的影响

第一节 研究目的

第二节 实验材料与方法

第三节 实验结果

第五章 LA对ORN所致少弱精子症大鼠睾丸ACP、AKP、LDH、SDH活性的影响

第一节 研究目的

第二节 实验材料与方法

第三节 实验结果

第六章 LA对ORH所致少弱精子症大鼠附睾中性α-葡糖苷酶活性、LC含量以及OCTN2蛋白表达水平的影响

第一节 研究目的

第二节 实验材料与方法

第三节 实验结果

第七章 LA对OR3q所致少弱精子症大鼠睾丸、附睾组织中SOD、CAT、GSH-Px活性，MDA含量，TAC以及Nrf2蛋白表达水平的影响

第一节 研究目的

第二节 实验材料与方法

第三节 实验结果

第八章 讨论

第九章 全文小结

参考文献

中英文缩略词表

成果

致谢

声明