摘要
第一章MYDGF对2型糖尿病小鼠糖脂代谢及GLP-1分泌的影响
1.1前言
1.2实验试剂及仪器
1.2.1实验试剂
1.2.2实验主要仪器
1.2.3溶液配制
1.3实验方法
1.3.1实验动物的饲养以及动物模型的建立
1.3.2病毒转染检测
1.3.3小鼠代谢水平检测
1.3.4 Real-time PCR检测回肠GLP-1相关转录因子mRNA表达水平
1.3.5回肠免疫荧光
1.3.6 Western blot检测信号蛋白表达量
1.4统计分析
1.5结果
1.5.1 MYDGF敲除小鼠体内MYDGF表达缺乏
1.5.2 AAV-MYDGF注射的小鼠体内持续表达MYDGF
1.5.3 MYDGF对各组小鼠生化指标的影响
1.5.4 MYDGF改善糖尿病小鼠葡萄糖耐量
1.5.5 MYDGF促进糖尿病小鼠肠道L细胞分泌GLP-1
1.5.6 MYDGF上调GLP-1相关基因表达
1.6讨论
1.7结论
参考文献
第二章MYDGF对L细胞株(STC-1细胞)分泌GLP-1的影响
2.1前言
2.2实验试剂与仪器
2.2.1实验主要仪器
2.2.2实验试剂
2.2.3试剂配制
2.3实验方法
2.3.1 STC-1细胞培养及活性测定
2.3.2实验分组
2.3.3 ELISA法检测STC-1细胞分泌GLP-1的含量
2.3.4实时荧光定量PCR(RT-PCR)
2.3.5 STC-1细胞免疫荧光染色
2.4统计分析
2.5结果
2.5.1 rMYDGF的最佳作用浓度和最佳作用时间
2.5.3 rMYDGF可以激活MEK/ERK和PKA/GSK3β/β-catenin信号通路
2.6讨论
2.7结论
参考文献
第三章MYDGF促进GLP-1分泌的作用机制
3.1前言
3.2实验仪器及试剂
3.2.1实验仪器
3.2.2实验试剂
3.2.3溶液配制
3.3实验方法
3.3.1实验动物饲养及细胞培养
3.3.2 Western blot检测组织相关蛋白的表达
3.4统计分析
3.5结果
3.5.1 MYDGF可激活MEK/ERK信号通路
3.5.2 MYDGF可激活PKA/GSK3β/β-catenin信号通路
3.6讨论
3.7结论
参考文献
全文结论
综述
攻读学位期间成果
致谢
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