人正常子宫内膜组织中树突状细胞的免疫组化研究

摘要

目的
　　利用免疫组织化学技术和图像分析技术,探讨HLA-DR~+和CDla~+树突状细胞(dendritic cell,DC)在人正常子宫内膜的分布特点、表达强度的变化以及可能的影响因素,为今后进一步研究女性子宫内膜病变的免疫学发生机理提供理论依据。
　　方法
　　取人正常增生期内膜组织(n=26),分泌期内膜组织(n=24),绝经期内膜组织(n=10),进行常规HE染色；并通过HLA-DR单克隆抗体和CDla蛋白抗体免疫组织化学染色标记人正常子宫内膜组织中的DC,光镜观察其分布以及形态特点,比较各组标本HLA一DR和CDla的阳性率以及阳性细胞数；同时结合图像分析技术,定量测定HLA一DR和CDla抗原在子宫内膜各个时期DC上表达强度的变化。结果人正常子宫内膜组织中存在表达主要组织相容性复合体一H(MHC一H)类分子的DC。免疫组化染色阳性DC呈棕黄色,其中增殖期和分泌期子宫内膜组织中DC形态不规则,胞体较大,表面可见长短不一,数目不等的树突状突起,细胞核不规则。绝大多数DC位于子宫内膜的功能层,呈区域性分布于腺体周围的间质内,可见到几个DC聚群包绕腺体的现象。绝经期子宫内膜组织中DC数量很少,在子宫内膜中稀疏分布,阳性细胞着色较浅,表面分枝减少,细胞多为无突起的圆形或椭圆形,胞浆突起变短、变少。2.免疫组织化学结果显示,增殖期子宫内膜,分泌期子宫内膜和绝经期子宫内膜HLA一DR免疫组化染色阳性率分别为69.2%、33.3%和10%；CDla染色阳性率分别为61.5%、33.3%和0,两两比较均有显著性差异(P<；0.05),其中绝经期子宫内膜中阳性率最低。增殖期子宫内膜和分泌期子宫内膜组织中HLA一DR和CD la阳性细胞数之间有统计学差异(P<；0.05)。3.图像分析定量处理显示,HLA一DR在增殖期子宫内膜和分泌期子宫内膜组织细胞中的表达强度无统计学差异(p>；0.05)；CDla在增殖期子宫内膜和分泌期子宫内膜组织上的表达强度有统计学差异(29.31士0.99vs26.09士1 .92,P<；0.05)。结论育龄妇女正常子宫内膜组织中存在表达主要组织相容性复合体一11(maj or histoeo娜atibility co娜lex,MHC一11)类分子的DC。2.增殖期子宫内膜组织HLA一DR和CD la阳性率均高于分泌期子宫内膜组织,增殖期子宫内膜组织中阳性细胞数也多于分泌期子宫内膜组织,提示雌、孕激素可能参与调控子宫内膜DC的分布以及数量变化。这种DC在子宫内膜的周期性变化可能是为了适应子宫内膜在不同时期的功能状况。3.绝经期子宫内膜DC检出率很低且数量稀少,推测绝经期子宫内膜癌高发的原因是由于绝经期子宫内膜组织中的DC缺如以及子宫内膜原位DC处于非活化状态,无法激发特异性CTLs反应,因而局部缺乏有效的免疫监控机制导致子宫内膜恶性肿瘤的发生。
　　4.本研究中HLA一DR抗原在增殖期子宫内膜组织和分泌期子宫内膜组织中的表达强度没有统计学差异(P>；0.05),推测虽然DC在子宫内膜增殖期和分泌期的数量有所不同,但功能状态没有显著性差异,即分泌期子宫内膜组织中的DC抗原提呈能力没有下降。
　　5.本研究中CDla抗原在增殖期子宫内膜组织和分泌期子宫内膜组织中的表达强度之间有统计学差异(P<；0.05),推测可能是子宫内膜不同时期DC处在不同分化发育阶段,因而成熟状态不同。

目录

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人正常子宫内膜组织中树突状细胞的免疫组化研究

1 前言

2 材料与方法

2.1 实验试剂

2.2 主要实验仪器

2.3 主要实验试剂及配制方法

2.4 免疫组织化学试剂配置方法

2.5 实验标本及处理方法

2.6 SP法免疫组织化学方法

2.7 染色结果的图像分析

3 结果

3.1 正常子宫内膜HE染色结果

3.2 正常子宫内膜免疫组化染色结果

3.3 HLA-DR和CDla在人正常子宫内膜组织表达的图像定量分析

4 讨论

参考文献

小结

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致谢

图版及其简要说明