甘氨酸对离体缺氧/复氧心肌功能、心肌细胞[Ca~(2+)]_i和TNF-α释放的影响

摘要

目的：观察甘氨酸(glycine,GLY)对缺氧/复氧离体心脏心功能、心肌细胞内游离钙、心肌细胞存活率和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fator-α,TNF-α)浓度的影响,进一步探讨甘氨酸对心肌缺血-再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的防治作用及其机制,为防治缺血性心脏病提供新的思路和方法。
　　方法：第一部分实验利用Langendorff灌流装置复制心肌缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型模拟心肌I/R,观察GLY对心功能的影响。将29只SD大鼠随机分为4组：①对照组 ②H/R组 ③0.05% GLY+H/R组 ④GLY对照组,观察各组左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP=LVSP-LVEDP)、左室收缩压最大上升速率(dp/dtmax)和左室舒张压最大下降速率(dp/dtmin。第二部分利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌H/R模型,实验分7组：①对照组 ②H/R组 ③低浓度甘氨酸(GLY)+H/R组 ④中浓度GLY+H/R组 ⑤较高浓度GLY+H/R组,⑥高浓度GLY+H/R组,⑦高浓度GLY对照组,观察心肌细胞内游离钙、心肌细胞存活率和TNF-α浓度。
　　结果：(1)心功能结果显示：H/R后各时间点大鼠心脏的LVSP,LVDP,dp/dtmax,dp/dtmin均低于缺氧前,各指标亦低于其余3组并且随着复氧时间的延长有所回升,直至复氧结束时H/R组LVDP,dp/dtmax,dp/dtmin仍低于其余各组(P<0.01,P<0.05)。GLY+H/R组复氧后LVSP,LVDP,dp/dtmax,dp/dtmin在各时点均高于H/R组,各指标随着复氧时间的延长也有所回升。(2)心肌细胞培养结果显示：H/R处理后,心肌细胞内游离钙的浓度明显高于对照组(P<0.01)。GLY(0.5-2.0)mmol/L能显著降低H/R心肌细胞内游离钙升高的程度,并呈剂量依赖关系,其中GLY(2.0 mmol/L)作用于H/R心肌细胞时,细胞内游离钙浓度最接近对照组游离钙浓度,明显低于H/R组(P<0.01)。GLY(2.0 mmol/L)+H/R组心肌细胞的存活率明显高于H/R组(P<0.01)、TNF-α的生成明显低于H/R组(P<0.05)。
　　结论：(1)一定浓度(0.5-2.0 mmol/L)的GLY,能显著减轻离体大鼠心脏缺氧后的复氧损伤,改善缺氧/复氧心肌的收缩和舒张功能,保护心脏。(2)一定浓度的GLY能够降低缺氧/复氧心肌细胞内[Ca2+]i,抑制细胞内钙超载,保护心肌。(3)GLY能够减少心肌细胞产生和释放TNF-α,提高心肌细胞存活率。(4)GLY可能通过抑制缺氧暨南大学硕士学位论文甘氨酸对离体缺氧/复氧心肌功能、心肌细胞「C犷十1；和TNF一a释放的影响/复氧心肌产生和释放TNF一。、抑制细胞内钙超载而减轻心肌细胞的损伤和死亡,从而发挥维护和改善心功能、保护心脏的作用。

目录

中文摘要

英文摘要

前言

1 MI/R损伤的分子机制

2 MI/R损伤时心功能的改变

3 抗MI/R的药物治疗

4 甘氨酸的细胞保护作用

材料和方法

第一部分 甘氨酸对缺氧／复氧离体心脏心功能的影响

第二部分 甘氨酸对缺氧／复氧心肌细胞[Ca~(2+)]i和TNF-α浓度的影响

实验结果

第一部分 甘氨酸对缺氧／复氧离体心脏心功能的影响

第二部分 甘氨酸对缺氧／复氧心肌细胞[Ca~(2+)]i和TNF-α浓度的影响

讨论

1 Langendorff离体灌流模型适合心脏研究

2 心肌细胞缺氧／复氧(H／R)模型的优点

3 甘氨酸对离体心脏心功能的影响

4 甘氨酸对H／R心肌细胞内游离钙浓度的影响

5 甘氨酸对H／R心肌细胞TNF-α生成的影响

6 甘氨酸的细胞保护机制

结论

参考文献

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