瑶药枸骨叶(Ilex latifolia Thunb.)化学成分及生物活性研究

摘要

枸骨叶,其原生植物鉴定为卫茅目冬青属冬青科大叶冬青(Ilex latifolia Thunb.),在我国两广地区分布较广,资源丰富,是瑶族地区用途较广的一种中草药。本文对采自连南地区枸骨叶化学成分进行了研究,并对枸骨叶的抑菌、解酒、护肝以及降血压、降低高脂饮食大鼠血甘油三酯和血胆固醇水平等生物活性进行了初步探讨。
　　从枸骨叶的乙醇提取物中分离得到5个单体化合物,2个混合物。通过IR、UV、NMR以及MS等方法对分离得到的化合物进行了波谱解析,单体化合物分别鉴定为：β—谷甾醇(1)和乌索烷—12—烯—3β,28—二羟基(2)、乌索酸(3),化合物4和化合物5结构待定。混合物通过GC-MS鉴定为：棕榈酸乙酯(6)、棕榈酸丁酯(7),乌索—9(11),12—二烯—3—醇(8)和β—香树脂醇(9),其中化合物2(乌索烷—12—烯—3β,28—二羟基)是首次从枸骨叶中分离得到。
　　采用水蒸气蒸馏法提取枸骨叶挥发性成分,并通过气相色谱—质谱联用分析,鉴定出枸骨叶挥发油中酸、酯、醇以及酮、酰胺、含氧萜类等42个化学成分,运用峰面积归一化法测定各化学成分的相对百分含量,已鉴定的化学成分占挥发油总量的83.46%。对枸骨叶挥发性成分的研究本文为首次报道。
　　采用用微量稀释法测定瑶药枸骨叶5种不同溶剂组分的最小抑菌浓度(MIC),探讨枸骨叶不同溶剂提取物的体外抑菌活性。结果表明枸骨叶中的3种溶剂组分(乙醇提取物、正丁醇和乙酸乙酯萃取物)均显示一定的抑菌效用(MIC≤2.50mg/mL),其乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的抑菌效果最为显著MIC为0.625mg/mL,醇提物和正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌也显示较好的抑菌效果MIC均为2.50 mg/mL。
　　采用小鼠急性酒精中毒实验模型和CCl4致小鼠急性肝损伤模型对瑶药枸骨叶以及枸骨叶—野葛花复方的解酒、护肝效果进行了初步研究。实验结果证明,枸骨叶以及枸骨叶—野葛花复方对降低小鼠的醉酒率、延长耐受时间、降低醉酒持续时间和血乙醇含量均有不同程度的效果。枸骨叶及复方也能有效降低CCl4致急性肝暨南大学硕士毕业论文损小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,其中构骨叶低剂量组、中剂量组和复方高剂量组效果较好。本文还研究了构骨叶对大鼠正常血压,对高脂饮食大鼠的血胆固醇、血甘油三醋的的影响,实验结果表明,饮用构骨叶茶对正常大鼠血压有降压作用,作用可维持Zh以上,静脉注射构骨叶水提物降压作用明显并呈现量效关系；进食高脂饲料的大鼠饮用构骨叶茶可防止血胆固醇及甘油三醋的上升,对甘油三酷的影响,也呈现量效关系。

目录

摘要

ABSTRACT

第一章 绪论

1.1 瑶族中草药研究的意义

1.2 枸骨叶研究进展

1.2.1 生药鉴别

1.2.2 化学成分研究

1.2.3 生物活性研究

1.2.4 存在问题

1.2.5 研究意义及前景

1.3 研究内容及方案设计

1.3.1 化学成分研究

1.3.2 生物活性研究

参考文献

第二章 枸骨叶乙醇提取物化学成分分离与鉴定

2.1 试剂材料及仪器

2.2 枸骨叶样品前处理

2.3 化学成分分离及分析

2.3.1 分离流程

2.3.2 物理常数与光谱数据

2.3.3 结果与讨论

参考文献

第三章 枸骨叶挥发性化学成分研究

3.1 仪器材料及试剂

3.2 方法及分析条件

3.3 实验结果

3.4 讨论

参考文献

第四章 枸骨叶抑菌活性研究

4.1 研究目的及意义

4.2 菌株

4.3 材料试剂及仪器

4.4 实验方法

4.4.1 样品制备

4.4.2 测试菌液的准备

4.4.3 抑菌实验方法及培养及结果判断

4.4.4 配对T检验及方差分析

4.5 实验结果

4.6 讨论

参考文献

第五章 枸骨叶及枸骨叶-野葛花复方解酒实验研究

5.1 研究目的

5.2 材料及仪器

5.3 样品制备

5.4 急毒性试验

5.5 酒量选择

5.6 枸骨叶及复方对急性酒精中毒小鼠醉酒率、醉酒持续时间及耐受时间的影响

5.6.1 实验方法

5.6.2 实验结果

5.6.3 讨论

5.7 枸骨叶及复方对急性酒精中毒小鼠血乙醇含量的影响

5.7.1 实验方法与实验原理

5.7.2 实验结果与讨论

5.8 结论

参考文献

第六章 枸骨叶及枸骨叶-野葛花复方护肝作用初探

6.1 研究基础及目的

6.2 仪器及材料

6.3 实验方法

6.4 实验结果

6.5 讨论

参考文献

第七章 枸骨叶药理实验初研究

7.1 研究目的

7.2 枸骨叶急毒性实验

7.3 枸骨叶对大鼠血压、呼吸、心电图的影响

7.3.1 材料和方法

7.3.2 实验结果

7.4 枸骨叶对高脂大鼠饮食胆固醇、甘油三酯水平的影响

7.4.1 材料和方法

7.4.2 实验结果

7.5 讨论

结束语

致谢

在校期间发表论文

附录