铅黄肠球菌降解十溴联苯醚特性及差异蛋白分析

摘要

自广东省汕头市贵屿镇电子垃圾拆解地采集的沉积物样品中分离得到1株对十溴联苯醚(BDE-209)有较好降解效果的菌株,鉴定为铅黄肠球菌(Enterococcus casseliflavus)。考察其对BDE-209的降解性能,以及在降解过程中菌体的细胞生物学特性,并利用双向电泳技术分析该菌在降解 BDE-209过程中的差异蛋白,以期从分子生物学角度阐明BDE-209在菌体内的降解机理。
　　研究表明,E.casseliflavus最适培养条件为培养基初始pH7,培养时间48h,培养温度30℃。时间、投菌量和菌龄对E.casseliflavus降解BDE-209都有一定的影响。天然pH,温度为30℃时,1g·L-1E.casseliflavus对1mg·L-1的BDE-209降解在4d时达到峰值,为56.7％。E.casseliflavus对BDE-209的降解主要发生在胞内环境,4d后体系中BDE-209的残留量维持在0.5mg·L-1左右。E.casseliflavus细胞具有较高的表面疏水性,为更好的吸附BDE-209提供了可能,但随着作用时间的延长,菌体表面疏水性有所下降。4d时E.casseliflavus在BDE-209胁迫下,菌体自身机制作出响应,菌体细胞质膜通透性增大,胞内BDE-209的含量增加,菌体出现少许细胞质外流等现象。6d菌体的再次生长使得细胞壁膜基团结构恢复正常,菌体形态为短杆状。
　　加入BDE-209后E.casseliflavus的生长状态发生了变化,细胞周期活动受到干扰,且E.casseliflavus降解BDE-209时发生了凋亡现象。E.casseliflavus在降解BDE-209过程中,菌体蛋白质组成发生了变化,BDE-209可诱导某类新的胞外蛋白质的生成,而胞内蛋白则随着 BDE-209含量的增加,表现为蛋白表达量的增减以及受BDE-209抑制而不表达某些蛋白质。E.casseliflavus降解1mg·L-1BDE-2094d后,与对照菌体相比共出现31个差异蛋白点,5个新的蛋白表达点,同时有13个蛋白点消失,表明在降解时菌体中与降解相关的蛋白构象发生了变化,导致蛋白种类和表达量的变化。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

第1章 前言

1.1环境中PBDEs污染

1.2环境PBDEs污染的微生物修复

1.3蛋白质组学在环境污染修复中的应用

1.4流式细胞术技术在微生物修复研究中的应用

1.5本论文研究的意义和主要研究内容

1.6技术路线

1.7创新点

第2章 十溴联苯醚降解菌的筛选、鉴定与生长特性

2.1实验材料与设备

2.2实验方法

2.3结果与分析

2.4本章小结

第3章 E. casseliflavus对BDE-209的降解特性

3.1实验材料与设备

3.2实验方法

3.3结果与分析

3.4本章小结

第4章 BDE-209对E. casseliflavus细胞特性的影响

4.1实验材料与设备

4.2实验方法

4.3结果与分析

4.4本章小结

第5章 E. casseliflavus降解BDE-209的差异蛋白分析

5.1实验材料与设备

5.2实验方法

5.3结果与分析

5.4本章小结

第6章 结论

参考文献

在校期间发表论文

致谢