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IGF-Ⅱ基因内含子来源的miR-483-5p对肝癌细胞生物学行为的影响

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前言

实验材料

一、实验标本

二、实验试剂

三、实验仪器

实验方法

一、Huh-7肝癌细胞的复苏与培养

二、转染

三、 取各组转染细胞miR-483-5p mimic、miR-483-5p Inhibitor、阴性对照RNA(NC)及空白对照(Huh7)进行以下实验。

四、统计学分析

实验结果

一、CCK-8法检测miR-483-5p对HCC细胞增殖能力的影响

二、流式细胞术检测miR-483-5p对HCC细胞周期的影响

三、流式细胞术检测miR-483-5p对HCC细胞凋亡的影响

四、Transwell检测miR-483-5p对HCC细胞迁移能力的影响

五、Transwell检测miR-483-5p对HCC细胞侵袭能力的影响

讨论

一、IGF-II基因过表达与肝细胞癌

二、miRNA的生成及作用机制

三、miRNAs与肿瘤

四、人mir-483与IGF-II基因表达

五、肿瘤的生长速度、迁移、侵袭能力与肿瘤预后的关系

结论

参考文献

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摘要

目的:研究miR-483-5p对肝癌(HCC)细胞生物学行为的影响。
  方法:采用脂质体法分别将miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及阴性对照RNA(NC)转染Huh7肝癌细胞,采用CCK-8法检测Huh7肝癌细胞的增殖能力变化,采用流式细胞术检测Huh7肝癌细胞的细胞周期及细胞凋亡变化,采用Transwell法检测Huh7肝癌细胞的迁移和侵袭能力变化。
  结果:①CCK-8法结果显示,与空白对照组及NC组细胞相比,转染miR-483-5p inhibitor的肝癌细胞增殖能力显著降低,转染miR-483-5p mimic的肝癌细胞增殖能力显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);②流式细胞术结果显示,与空白对照组及NC组细胞相比,转染miR-483-5p inhibitor的肝癌细胞的G1期细胞百分比显著增加,早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡均显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);转染miR-483-5p mimic的肝癌细胞的G1期细胞百分比显著减少,早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡数均减少,差异均具有统计学意义(P<0.05);③Transwell法结果显示,与空白对照组及NC组细胞相比,转染miR-483-5p inhibitor的肝癌细胞的迁移能力及侵袭能力均明显减弱,转染miR-483-5p mimic的肝癌细胞的迁移能力及侵袭能力均明显增强,差异均具有统计学意义(P<0.05)。
  结论:miR-483-5p可提高肝癌细胞的增殖能力,促进肝癌细胞周期进展,抑制肝癌细胞凋亡,增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。

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