大豆卵磷脂稳定性及酶法水解制备甘油磷脂酰胆碱研究

摘要

本研究，通过研究大豆磷脂软胶囊内容物大豆卵磷脂在贮藏过程中各指标的变化及原因，对其稳定性进行了研究。并使用磷脂酶A1酶解大豆卵磷脂PC35中的磷脂酰胆碱，经过纯化后，制备有药用价值的高纯度甘油磷脂酰胆碱。 首先，以大豆磷脂软胶囊为研究对象，对其内容物大豆卵磷脂在正常贮藏和加速水解条件下的稳定性进行了研究。结果表明，大豆磷脂软胶囊在贮藏过程中,随时间的延长PC含量降低，酸值升高，水分含量增加。其原因是，PC在贮藏过程中发生水解释放出脂肪酸，导致PC含量降低，胶囊内容物酸值升高。此外，大豆油发生水解，其甘油酯组成发生变化，同时释放出脂肪酸,进一步促进了酸值的升高。 其次，以大豆卵磷脂PC35为原料，加入大豆油与水形成均一的油包水型乳化体系作为绿色溶剂，使用磷脂酶A1对PC进行水解制备GPC。并对影响GPC得率的大豆油与PC35的比例、反应温度、水分添加量、酶添加量、反应时间等因素进行了分析。通过单因素实验及响应面分析，得到酶水解体系的最佳反应条件为：大豆油与PC35的最佳比例为4:1，反应温度55℃，水分添加量30wt%，磷脂酶A1添加量5wt%，反应时间3h，最终GPC的得率为95.53%。 最后，在最佳反应条件之下，将反应体系扩大了十倍，磷脂酶A1催化PC35中的PC水解制备GPC表现出良好的催化活性，放大反应的重现性良好。然后经过甲醇提取、离心、丙酮脱油、硅胶柱层析、活性炭脱色、真空冷冻干燥等多种纯化技术联合使用对酶水解产物进行纯化，并对影响硅胶柱纯化效果的主要因素洗脱流速及上样浓度进行了优化，最终得到最佳洗脱流速为2mL/min，最佳上样浓度为6mg/mL。纯化后得到的GPC产品使用HPLC-ELSD分析测定其纯度，最终所得GPC产品的纯度为96.6%。然后使用LC-MS、31P–NMR和ATR-FTIR等技术对其进行定性分析，并与GPC标准品进行对比，最后证实本研究中制备、纯化得到的样品就是GPC。

目录

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中英文缩写表

第一章．绪论

1.2磷脂酰胆碱的概述

1.3磷脂酶A1的概述

1.4甘油磷脂酰胆碱概述

1.5硅胶柱色谱简介

1.6选题背景、意义及创新点

1.7本课题主要研究内容

第二章.大豆卵磷脂软胶囊贮藏过程中品质变化研究

2.3实验方法

2.4 结果与讨论

2.5结论

第三章．油包水型乳化体系中酶法制备甘油磷脂酰胆碱

3.3实验方法

3.4结果与讨论

3.5结论

第四章．甘油磷脂酰胆碱的纯化技术研究

4.3实验方法

4.4结果与讨论

4.5结论

第五章．结论与展望

5.2展望

参考文献

硕士在读期间发表的论文及学术成果

致谢