黑木相思白腐病病原鉴定

摘要

黑木相思(Acacia melanoxylon)为含羞草科(Mimosaceae)金合欢属(AcaciaMill.)乔木，作为中短轮伐期珍贵树种，现已成为我国多个省份首推的相思树种。近年来，广东省部分黑木相思种植基地发生了一种新病害，该病害导致枝干枯死或植株死亡，造成了严重经济损失，制约了当地黑木相思的推广种植。为此，本研究对广东省黑木相思病区进行调查，采集病组织进行病原菌分离、纯化、鉴定和致病性测定，以确定病原菌，并检测了不同无性系的抗病性，为进一步研究该病害的预防措施提供参考。主要研究成果如下：
　　1、本研究发现了一种新病害，黑木相思白腐病。该病害多于春季发病，发病率27％，主要发生在4~6年生树木，发病枝干直径约6~10c m，病斑梭形，主干或侧枝发病部位树皮下陷，病健交界分明，剖开树皮可观察到病健交界处有明显的棕色至黑色分界线。从发病部位的横向和纵向剖面可看出韧皮部呈褐色或棕黑色，木质部呈深褐色或黑色。发病多年的树木树皮开裂，剖开树皮可看到白色腐朽物。该病害造成黑木相思枝干一边枯死，严重时可致整株枯死。
　　2、验证柯赫氏法则。通过病原菌分离、纯化、致病性测定及再分离，初步判定黑木相思白腐病病原菌。使用目的菌株接种半年生和两年生黑木相思17号无性系植株，发病症状与林间自然发病症状相一致，再分离得到菌株与接种菌株相一致。接种后，在发病初期，病斑梭形，棕色至黑色，下陷，病健交界分明，交界处病斑颜色加深，剖开树皮有黑色分界线，病斑绕茎横向扩展至3/4左右；发病后期，枝干变色枯死，植株近根部有绿色小芽长出，严重时可致整株死亡。
　　3、结合形态学和分子生物学完成病原菌鉴定。采用常规组织分离法获得的目的菌株在 PDA平板上的形态特征为菌落白色，辐射状，菌丝稀疏，呈绒毛状，后变致密，呈毡状平伏于平板；愈创木酚反应8min后，滴定区域变浅红；菌丝透明，光滑，较直，具锁状联合，常从联合处分支，初期直径3.5~4.2μm，后期直径2.6~3.4μm；分生孢子圆柱状，薄壁，无色，内含有0~3个球状体，多数为1个，孢子大小5.6~9.4×2.5~3.5μm。利用引物ITS1/ITS4、ITS5/ITS4和ITS1-F/ITS4-B对目的菌株进行扩增，得到长度分别为558bp、577bp、726bp的序列，BLAS T比对分析后显示目的菌株与Pseudolagaroba sidium acac iico la同源性分别为99%、99%、98%。将测序结果提交到Ge nBa nk上，获得登记号分别为 MF099657、MF135489、MF135490。结合形态学确定该病原菌为相思生伪壶担菌（P.acaciicola），其分类地位为真菌界（Fungi），担子菌门（Basidiomycota），伞菌纲（Agaricomycetes），多孔菌目（Polyporales），原毛平革菌科（Phanerochaetaceae），伪壶担菌属（Pseudolagarobasidium J.C.Jang&T.Chen）。该菌种是我国新纪录种，也是世界首次报道的由相思生伪壶担菌引起的黑木相思病害病原。
　　4、黑木相思不同无性系对白腐病抗性评价。结果显示，黑木相思6号、17号、20号、47号无性系对白腐病的抗性存在明显差异。初步认为，6号无性系为中抗，20号无性系为低抗，47号无性系为低感，17号无性系为高感。

目录

声明

缩写词及英汉对照

1前言

1. 1黑木相思栽培现状

1. 2 黑木相思病虫害发生现状

1. 3木材腐朽菌研究进展

1.4Pseudolagarobasidium属的建立及分类研究

1. 5研究目的及意义

2. 1材料

2. 2方法

3结果与分析

3. 1黑木相思林间病害调查结果

3. 2 病原菌分离与纯化

3. 3 致病性测定

3. 4病原菌形态学鉴定结果

3. 5病原菌分子生物学鉴定结果

3. 6黑木相思白腐病抗性评价

4. 1结论

4. 2 讨论

致谢

参考文献

附录