广东省某种鸡场禽白血病的净化与病毒株的分离鉴定

摘要

为了了解广东省某种鸡场禽白血病病毒（ALV）感染情况并进行ALV净化工作，本试验初步调查该场的ALV发病情况，分离父母代鸡群及商品代鸡群ALV，分析ALV的遗传变异情况。本研究首先在父母代种鸡群中分离到一株毒株，命名为F1毒株，在商品代蛋鸡群中分离到两株ALV毒株，分别命名为S1-1和S1-2毒株。F1和S1-1毒株之间的env序列和LTR区的同源性分别为96.6%和97.6%，高于与其他所有亚群的同源性，其中F1和S1-1毒株的env序列和LTR区与ALV-J参考株GDQY1201同源性最高，与内源性病毒同源性最低，并且F1和S1-1两个毒株与S1-2毒株之间的env序列和LTR区的同源性很低，S1-2毒株的env序列和LTR区与内源性病毒的env序列的同源性最高，与ALV-J分离株的同源性最低。由此可知商品代鸡群存在J亚群ALV与内源性病毒混合感染的现象。
　　针对上述鸡场进行ALV净化方法的比较：1、病毒分离法与蛋清检测法比较：选择商品代蛋鸡群编号为S1～S6的6只疑似患病鸡为研究对象，其中S2、S3、S5、S6号鸡的蛋清检测结果与病毒分离法的检测结果相同，S1和S4号鸡的蛋清检测结果为阳性，病毒分离法检测结果为阴性，但S1和S4号鸡均有ALV临床感染症状。由测序结果可知S1鸡为内、外源性ALV混合感染，但是病毒分离法不能将其有效检测出来的原因还需进一步研究；2、泄殖腔拭子和蛋清检测法的比较：分别检测核心育种群180只母鸡的泄殖腔拭子和蛋清样品，结果发现泄殖腔拭子阳性率为40.6%，蛋清阳性率为16.7%，泄殖腔拭子假阳性过高。本研究针对该鸡场的特殊情况，选择母鸡采取蛋清检测法和公鸡采取病毒分离法对该种鸡群进行禽白血病病毒净化，共净化2439份，其中总阳性率为13.9%。
　　综上研究发现商品代鸡群中存在内、外源性ALV混合感染的现象，且病毒分离法不能将其有效的检测出来。因此本试验选择蛋清检测法检测母鸡，病毒分离法检测公鸡的方案。本试验在商品代鸡群中发现内、外源性ALV混合感染的现象，并且临床症状严重，针对该场复杂的感染现象，制定适合该场的净化方案，有效的实施净化工作。

目录

声明

常用英文缩略表

1前言

1 .1禽白血病简介

1 .2禽白血病发展史

1 .3禽白血病流行病学

1 .4禽白血病病原学

1. 5 禽白血病的防控及净化

1. 6 本研究的目的和意义

2. 1材料

2. 2实验方法

3. 1 剖检症状

3. 2 病理学变化

3. 3 病毒基因PCR检测

3. 4 ALV分离株前病毒env基因PCR扩增结果

3. 5 ALV分离株前病毒env基因序列分析

3. 6 ALV分离株前病毒LTR区PCR扩增结果

3. 7 ALV分离株前病毒LTR区序列分析

3. 8 ALV-BD特异性条带分析

3.9 DF-1细胞和CEF细胞检测结果

3. 10 ALV净化

4 讨论

4. 1 ALV的混合感染

4. 2 种鸡群的净化方法分析

4. 3 种鸡群的ALV净化

5 结论

致谢

参考文献

附录A F1、S1-1和S1-2毒株序列

附录B 硕士期间论文发表情况