平菇菌株提纯复壮技术应用效果研究

摘要

本试验以平菇“99”菌株为试验材料，采用组织分离、尖端分离、原生质体再生技术分别进行提纯复壮技术的应用效果进行研究，试验共获得59个分离菌株，经过初步筛选得到19个优势菌株;进一步对19个优势菌株进行生理、生化、真实性及农艺性状等检测，获得了性状优良的提纯复壮菌株11个，主要研究结果如下:
　　(1)利用组织分离技术获得4个菌株，菌丝长速、漆酶活性等性状测定结果表明，4个复壮菌株在漆酶活性、生物学产量菌丝生长速度等方面均优于出发对照菌株;4个复壮菌株在酯酶同工酶和ISSR电泳图谱中与对照菌株无显著差异。综合农艺性状进行筛选获得三个优势复壮菌株，分别命名为“PoZ1”、“PoZ2”、“PoZ3”。
　　(2)利用尖端菌丝分离技术获得3个分离菌株，菌丝长速、漆酶活性等性状测定结果表明，3个复壮菌株在漆酶活性、发酵液生物产量、生物学产量等方面均优于出发对照菌株;3个复壮菌株母种、栽培种菌丝日平均生长速度均快于出发对照菌株;有2个菌株在原种菌丝日平均生长速度快于出发对照菌株;3个复壮菌株在酯酶同工酶和ISSR电泳图谱中与对照菌株无显著差异。综合农艺性状进行筛选获得两个优势复壮菌株分别命名为“PoJ1”和“PoJ2”。
　　(3)运用原生质体再生技术分离得到50个菌株，通过对50个菌株进行菌丝长速、菌丝颜色、菌落形态等筛选获得12个优势复壮菌株，进一步对12个复壮菌株的菌丝长速、漆酶活性等性状研究表明，10个复壮菌株母种菌丝和原种菌丝日平均生长速度显著优于对照菌株，6个菌株在栽培种菌丝日平均生长速度方面优于对照菌株，12个复壮菌株在漆酶活性、菌丝生物产量、第一潮菇产量等方面均优于出发对照菌株，12个复壮菌株在酯酶同工酶和ISSR电泳图谱中与对照菌株无显著差异。综合农艺性状进行筛选获得6个优势复壮菌株，分别命名为“Po11”、“Po23”、“Po26”、“Po30”、“Po45”、“Po46”，其中“Po45”菌株在菌丝长速、发酵液生物产量、第一潮菇产量等方面优于其他复壮菌株。
　　(4)通过对三种复壮技术获得的菌株进行筛选比较。结果表明应用原生质体再生复壮技术提纯平菇菌株应用效果最佳，利用原生质体再生复壮技术获得复壮菌株在菌丝长速、漆酶活性、第一潮菇产量、农艺性状等方面都要优于组织分离与尖端分离复壮技术获得的菌株。

目录

声明

摘要

缩略词表

第一章 绪论

1．1 平菇概述

1．1．1 平菇的地位及特性

1．1．2 平菇的食药用价值

1．1．3 平菇的栽培现状

1．2 菌种退化

1．2．1 菌种退化概念及表现

1．2．2 引起菌种退化的原因

1．3 菌种老化

1．3．1 菌种老化概念及表现

1．3．2 菌种老化的原因

1．4 菌种提纯复壮

1．4．1 菌种提纯复壮的措施

1．4．2 菌种提纯复壮技术

1．5 菌种质量检测

1．5．1 菌种质量概括

1．5．2 菌种质量检测的方法

1．6 研究的技术路线、目的和意义

1．6．1 研究目的意义

1．6．2 技术路线

第二章 组织分离复壮技术应用研究

2．1 试验材料

2．1．1 供试菌株

2．1．2 供试培养基

2．1．3 供试试剂及配制

2．1．4 主要仪器及设备

2．2 试验方法

2．2．1 组织分离法

2．2．2 平板菌丝长速测定

2．2．3 原种菌丝长速测定

2．2．4 栽培种菌丝长速测定

2．2．5 液体发酵液生物产量测定

2．2．6 漆酶活性测定

2．2．7 出菇试验

2．2．8 遗传差异检测

2．3 结果与分析

2．3．1 组织分离

2．3．2 组织分离复壮菌株母种长速与漆酶活性测定

2．3．3 组织分离复壮菌株原种长速测定

2．3．4 组织分离复壮菌株栽培种长速与漆酶测定

2．3．5 组织分离复壮菌株发酵液生物产量与漆酶测定

2．3．6 组织分离复壮菌株农艺性状

2．3．7 组织分离复壮菌第一潮菇产量测定

2．3．8 组织分离复壮菌株真实性检测

2．4 小结

3．1 试验材料

3．2．3 原种菌丝长速测定

3．2．4 栽培种菌丝长速测定

3．2．5 复壮菌株发酵液生物产量测定

3．2．6 复壮菌株漆酶活性测定

3．2．7 复壮菌株出菇验证

3．2．8 复壮菌株真实性检测

3．3 结果与分析

3．3．1 尖端分离

3．3．2 尖端分离复壮菌株母种长速与漆酶活性测定

3．3．3 尖端分离复壮菌株原种菌丝生长速度测定结果

3．3．4 尖端分离复壮菌株栽培种长速与漆酶活性测定

3．3．5 尖端分离复壮菌株发酵液生物产量与漆酶测定

3．3．6 尖端分离复壮菌株农艺性状

3．3．7 尖端分离复壮菌株第一潮菇产量测定

3．3．8 尖端分离菌株真实性检测

3．4 小结

4．1 试验材料

4．1．1 供试菌株

4．1．2 供试培养基及制备

4．1．3 供试试剂及配制

4．1．4 主要仪器设备

4．2 试验方法

4．2．1 出发菌株的原生质体的制备再生与再生菌丝初步筛选

4．2．2 母种菌丝长速测定

4．2．3 原种菌丝长速测定

4．2．4 栽培种菌丝长速测定

4．2．5 复壮菌株发酵液生物产量测定

4．2．6 复壮菌株漆酶活性测定

4．2．7 复壮菌株出菇验证

4．2．8 复壮菌株真实性检测

4．3 结果与分析

4．3．1 原生质体的制备

4．3．2 原生质体再生菌株筛选

4．3．3 原生质体再生复壮菌株母种长速度与漆酶活性测定

4．3．4 原种长速测定

4．3．5 原生质体再生复壮菌株栽培种长速与漆酶活性测定

4．3．6 原生质体再生复壮菌株发酵液生物产量与漆酶活性测定

4．3．7 原生质体再生复壮菌株农艺性状比较结果

4．3．8 原生质体复壮菌株第一潮菇产量测定

4．3．9 原生质体再生复壮菌株真实性检测

4．4 小结

第五章 讨论与结论

参考文献

作者简历

致谢