绿豆癀护肝解毒作用及其机制研究

摘要

一、研究目的及意义： 绿豆癀是绿豆的加工制品，主产于台湾中南部山区，在台湾全岛被广为使用，认为功同绿豆，效果比绿豆更佳。本研究对台湾民间常用绿豆癀的加工方法、功效主治和使用经验进行系统整理，为规范其运用奠定基础；初步阐明绿豆癀的护肝、解毒作用及其机制，阐明绿豆癀的营养成分及化学成分，揭示其护肝、解毒作用的物质基础及其机制，为绿豆的开发利用拓宽途径，为市场提供一作用机制、物质基础明确的保健食品提供科学依据。 二、研究方法： 1、药理试验 研究以下主要选用了五大试验来评估绿豆癀的解毒和降脂作用，并探讨其部分作用机制。其中绿豆癀用双蒸水配制成浓度分别为0.15咖1、0.075g/ml、0.375g/ml的高、中、低三个剂量的溶液；绿豆粉用双蒸水配制成浓度2.0g/ml绿豆粉溶液。用以比较绿豆癀作用是否优于绿豆粉，以及绿豆癀不同于绿豆粉的作用。 (1)绿豆癀抗CCl<,4>肝损伤作用的实验研究 (2)绿豆癀调节血脂作用的实验研究 (3)绿豆癀对肝GSH、GST 影响的实验研究 (4)绿豆癀对肝CYP同功酶影响的实验研究 2、药学试验研究 (1)绿豆癀中蛋白质的测定；(2)绿豆癀中氨基酸的测定；(3)绿豆癀中不溶性膳食纤维的测定；(4)绿豆癀中核黄素的测定；(5)绿豆癀中胡萝卜素的测定；(6)绿豆癀中硫胺素的测定；(7)绿豆癀中烟酸的测定。 三、研究结果: 1、药理试验结果: (1)绿豆癀抗CCl<,4>肝损伤作用的实验结果AST、ALT：与正常对照组相比，模型组小鼠血清 AST、AIT 含量均明显升高(P<0.01)，表明 CCl<,4>肝损伤造模成功。绿豆癀低、中剂量能抑制小鼠血清AST 的升高(P<0.05)，绿豆粉和绿豆癀高剂量均能抑制小鼠血清AST升高，但与模型组相比无统计学意义；绿豆粉和不同剂量的绿豆癀均能抑制小鼠血清 ALT的升高(P<0.01或P<0.05)；而绿豆癀低剂量组比绿豆粉组有更好的效果(P<0.05)。 肝组织病理：与正常对照组相比，模型组小鼠肝细胞气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、肝细胞坏死均多于正常对照组，尤其是后者，模型组与正常对照组有明显差异(P<0.01)，绿豆癀高剂量组的肝细胞坏死程度比模型组轻，两者有显著差别(P<0.05)。但各治疗组小鼠肝细胞气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、肝细胞坏死与模型组相比无统计学意义。 (2)绿豆癀抗酒精性肝损伤作用的实验结果 TG、MDA、GSH：与正常对照组相比，模型组 TG、MDA 均明显升高，GSH明显降低(P<0.01．或P<0.05)，表明成功复制出小鼠酒精肝损伤模型。绿豆粉和绿豆癀各剂量均能降低MDA，但与模型组相比无统计学意义；绿豆粉和绿豆癀各剂量均能升高GSH，但只有绿豆粉和绿豆癀低剂量组与模型组相比，有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。绿豆粉和绿豆癀各剂量均能降低TG，但只有绿豆粉和绿豆癀中剂量组与模型组相比，有统计学意义(P<0.01)。 肝组织病理：与正常对照组相比，模型组小鼠肝细胞脂肪变性明显多于正常对照组(P<0.01)。各治疗组小鼠肝细胞脂肪变性与模型组相比明显减少(P<0.01)。 (3)绿豆癀调节血脂作用的实验结果 TG、LDL-C、HDL-C：与正常对照组相比，模型组 TG、LDL-C 均明显升高，HDL-C 明显降低(P<0.01)，表明成功复制出大鼠高脂血症模型。绿豆粉和绿豆癀低、中剂量虽能降低 LDL-C，但与模型组相比，无统计学意义，绿豆癀高剂量能明显降低 LDL-C(P<0.01)，而且其效果明显比绿豆粉组高(P<0.05)；绿豆粉和绿豆癀各剂量均能明显降低 TG、升高 HDL-C(P<0.01或P<0.05)，绿豆癀中、高剂量的效果更佳，与绿豆粉相比有明显差异(P<0.01)。 (4)绿豆癀对肝GSH、GST 影响的实验结果 泼尼松龙组 GSH 比空白对照组明显降低 (p<0.01)。绿豆粉组和绿豆癀三组GSH降低均比泼尼松龙组小(p<0.05或p<0.01)。绿豆癀组尤以高剂量下降最小，中剂量次之，高剂量与绿豆粉比较有明显差异(p<0.01)。绿豆癀的高剂量组可以提高GSH-Re的活性。 (5)绿豆癀对肝CYP同功酶影响的实验结果 绿豆粉和绿豆癀3组均可使小鼠肝线粒体CYP含量明显升高 (p<0.01)，尤以绿豆癀高剂量组作用最强，其与绿豆粉组相比，亦有明显差异 (p<0.05)。从表8可以看出，绿豆癀中、高两组CYP同功酶EROD和ANH的活性明显下降，而ERD的活性明显升高 (p<0.01或p<0.05)，尤以高剂量组作用更强。 2、绿豆癀化学及营养成分测定的实验结果 绿豆癀中蛋白质含量略低于绿豆粉，但无显著的统计学差异；绿豆癀中氨基酸含量、不溶性膳食纤维、核黄素、胡萝卜素、硫胺素和烟酸含量均高于绿豆粉组。 四、结论: 提示绿豆癀有较好的护肝解毒作用和较明显的降血脂作用。其作用机制除了一般的抗氧化作用外，还可能与调节CYP酶系中不同酶的活性有关。在实验中，还设立了绿豆粉组作对照。在各实验组中，绿豆粉与绿豆癀有相似的作用，但总的看来，作用比绿豆癀低。在本研究中，还对绿豆癀的多项化学及营养成分进行了测定。结果是绿豆癀中所含多项氨基酸、不溶性膳食纤维、核黄素、胡萝卜素、硫胺素及烟酸等各类化学及营养成分较绿豆粉明显为高。 本研究的创新点是：(1)对台湾民间常用的绿豆癀的加工方法、功效主治和使用经验进行了较系统整理；(2)通过多种动物模型和多项指标(尤其是肝药酶指标)探讨了绿豆癀的护肝、解毒的药理作用及其机制；(3)初步阐明绿豆癀的营养成分及化学成分，揭示其护肝、解毒作用的部分物质基础。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一部分 文献研究

1. 中医药学对绿豆的传统认识与现代研究

1.1 中医药学对绿豆的传统认识

1.2 绿豆的现代研究

2. 绿豆癀的制法和使用

3. 中医药学对"毒"与"毒邪"的认识

4. 化学性肝损害与中医药防治研究

第二部分 实验研究

实验一 绿豆癀抗CCl4肝损伤作用的实验研究

1 材料

2 方法

3 统计方法

4 结果

5 讨论

实验二 绿豆癀抗酒精性肝损伤作用的实验研究

1 材料

2 方法

3 统计方法

4 结果

5 讨论

实验三 绿豆癀调节血脂作用的实验研究

1 材料

2 方法

3 统计方法

4 结果

5 讨论

实验四 绿豆癀对肝GSH、GSH-Re影响的实验研究

1 材料

2 方法

3 统计方法

4 结果

5 讨论

实验五 绿豆癀对肝CYP同功酶影响的实验研究

1 材料

2 方法

3 统计方法

4 结果

5 讨论

实验六 绿豆癀化学及营养成分测定的实验研究

1 绿豆癀中蛋白质的测定

2 绿豆癀中氨基酸的测定

3 绿豆癀中不溶性膳食纤维的测定

4 绿豆癀中核黄素的测定

5 绿豆癀中胡萝卜素的测定

6 绿豆癀中硫胺素的测定

7 绿豆癀中烟酸的测定

第三部分 结语与展望

参考文献

附录

致谢