不同浓度黄芪、丹参、黄体酮注射液对精子内Ca2+作用研究

摘要

目的：通过精子体外添加不同浓度黄芪、丹参、黄体酮注射液，来研究其对精子内Ca2+浓度的影响。
　　方法：将28例标本采自本院门诊，随机分成4组：空白组，黄芪组，丹参组，黄体酮组，各组加入等量不同浓度试剂，Fluo3—AM被动扩散进人细胞后，被酯酶水解释放出Fluo3，Fluo3与钙离子络合，受波长488 nm的激光激发而产生荧光，其荧光值与Ca2+呈正相关，应用流式细胞仪（FCM）及激光共聚焦（LSCM）测定精子内Ca2+浓度。所有数据在SPSS11．0统计软件上分析。
　　结果：⑴FCM检测黄体酮注射液、黄芪注射液组精子内Ca2+的荧光强度与丹参注射液、空白组比较差异有统计学意义（P<0.05），表明体外添加黄体酮注射液、黄芪注射液可以使精子内Ca2+浓度增加；⑵黄芪注射液组高、中浓度荧光强度明显增强；黄芪注射液组低浓度荧光强度明显较弱，与高、中浓度比较，差异有统计学意义（P<0.05）；黄体酮注射液组高、中、低浓度荧光组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。⑶LSCM测定黄芪注射液组、黄体酮注射液组与丹参注射液组比较差异有统计学意义（P<0.05）；丹参注射液组与空白组比较差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：黄芪注射液能促进精子Ca2+内流和细胞内Ca2+浓度增加，高浓度、中浓度黄芪能明显增加精子内Ca2+水平；黄体酮也能促进精子Ca2+内流和细胞内Ca2+浓度增加，且与黄体酮药物浓度相关，药物浓度越高，促进Ca2+内流能力越强；丹参对精子细胞内Ca2+浓度的改变不明显。表明部分中药可能通过增加精子内Ca2+浓度，从而增强体外精子的运动活力，提高人工辅助生殖的受孕几率。

目录

声明

引言

第一部分 文献研究

1 中医对男性不育的认识

1.1 病因病机

1.2 辩证论治

2 现代医学对男性不育的认识

2.1男性不育的概念

2.2 病因

3 黄芪、丹参的现代研究

3.1黄芪

3.2丹参

4 目前研究存在的不足

第二部分 临床研究

1 材料与方法

1.1 材料来源

1.2 纳入标准

1.3 排除标准

1.4 主要仪器及试剂

2 研究方法

2.1 药物浓度配制

2.2 精子洗涤

2.3 试剂添加

2.4 负载Fluo3-AM的精子悬液制备

2.5 FCM测定精子胞浆Ca2+

2.6 LSCM（激光共聚焦）分析精子细胞内Ca2+浓度

2.7 数据统计分析

3 结果

3.1 FCM检测不同药物及浓度对精子内Ca2+浓度的影响

3.2 FCM测定黄芪组、黄体酮各浓度组组内比较

3.3 LSCM测定不同药物对精子内荧光强度影响

第三部分 讨论

结语

参考文献

附录

附录1

附录2

附录3

致谢