自然衰老的SD大鼠卵巢及子宫组织形态学变化规律的实验研究

摘要

目的：光镜下观察不同月龄阶段的SD大鼠卵巢（卵泡、动情周期黄体、间质腺、生发上皮）及子宫(动情周期)组织形态学变化趋势，统计分析不同月龄阶段卵巢及子宫组织形态变化规律，为药物安全评价提供基础性数据；避免在药物长期毒性试验中出现误诊（把自然衰老误认为药物毒性所致病变）；了解在国内现有饲养条件下自然衰老的雌性SD大鼠卵巢及子宫组织形态学的特征，并与国外现有资料比较；为中药/西药抗衰老研究参数选择提供可靠的定量、半定量的依据。
　　方法：SD大鼠，雌性，SPF级，共40只，全营养饲料饲养，自由饮食，不做任何处理，分别于3月末、14月末、17月末、18月末各取10只，予以水合氯醛麻醉后，断颈处死，取出卵巢和子宫，固定于10%的福尔马林中。将固定好的卵巢和子宫行脱水、包埋、连续5μm切片、HE染色。光学显微镜下观察其卵巢（卵泡、动情周期黄体、间质腺、生发上皮）及子宫(动情周期)组织形态学特征，并将各个不同时期卵巢及子宫的组织形态相比较鉴别。
　　结果：初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡、卵巢卵泡总数及异常卵泡在3月龄组、14月龄组、17月龄组、18月龄组SD大鼠卵巢的平均值分别为（2.125±1.1260）、（1.875±1.1260）、（6.625±3.3780）、（10.625±4.4701）、（0.125±0.3536）；（0.800±0.9189）、（0.400±0.6992）、(0.200±0.4216)、(1.400±0.9661)、(0.500±0.7071)；（0.400±0.9661）、（0.000±0.0000）、(0.600±1.0750)、(1.000±2.0000)、(0.400±0.5164)；（0.400±0.8944）、（0.200±0.4472）、（1.600±1.1402）、（2.200±1.6432）、（0.800±1.7889）。初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡、卵巢卵泡总数在卵巢组织中的平均数值随月龄的增加逐渐减少且与3月龄组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；异常卵泡在卵巢组织中平均值在数值上随年龄增加而逐渐增多，但各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。动情期、动情后期、动情间期、动情前期及卵巢黄体总数在3月龄组、14月龄组、17月龄组、18月龄组卵巢组织中的平均值分别为（1.750±1.0351）、（2.125±0.6409）、（0.500±0.5346）、（16.625±3.9256）、（19.000±3.8545）；（0.300±0.4830）、（1.400±1.4298）、(5.300±1.7670)、(2.700±3.0569)、(9.700±4.1110)；（0.200±0.4216）、（0.600±1.5776）、(2.200±1.4757)、(5.600±3.2042)、(8.500±2.6771)；（3.200±3.1937）、（1.000±1.2247）、（1.600±1.5166）、（1.000±1.4142）、（6.800±2.5884）。动情前期的卵巢黄体平均值随月龄的增加而逐渐减少且与3月龄组比较有统计学意义（P＜0.001）；动情期的卵巢黄体平均值随月龄的增加先减少而后有较大幅度增加与14月龄组、17月龄组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；动情后期的卵巢黄体平均值随月龄的增加变化不大，各组间差异无统计学意义（P＞0.05）；动情间期卵巢黄体平均个数先增多而后趋于稳定，与3月龄组比较差异有统计学意义（P＜0.05），14月龄组与17月龄组、18月龄组差异有统计学意义（P＜0.01）；卵巢黄体总数随月龄增加呈现递减趋势且与3月龄组比较差异均具有统计学意义（P＜0.001），14、17、18月龄组间差异无统计学意义（P＞0.05）；间质腺在卵巢组织中的增生程度各组间差异具有统计学意义（P＜0.05）；卵巢生发上皮的增生情况及子宫动情周期变化情况各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　结论：卵巢在自然衰老过程中随月龄的增加组织形态学变化明显，初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡、卵巢卵泡总数在卵巢组织中的平均数值随月龄的增加逐渐减少且与3月龄组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；异常卵泡在卵巢组织中平均值在数值上随年龄增加而逐渐增多，但各月龄组间差异无统计学意义（P＞0.05）。卵巢黄体总数随月龄增加呈现递减趋势，与3月龄组比较差异均具有统计学意义（P＜0.001）。间质腺随月龄增加在卵巢组织中的增生程度各组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。卵巢生发上皮的增生情况随月龄增加各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。子宫动情周期变化情况随月龄增加各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究首次在国内建立了符合我国实验动物现状的不同月龄阶段SD大鼠卵巢及子宫组织形态改变的基础性数据和组织形态改变的参考范围，并分析了不同月龄阶段SD大鼠卵巢及子宫组织形态变化趋势。

目录

声明

引言

第一部分 文献研究

第一节 自然衰老的研究现状

一、自然衰老的相关概念

二、自然衰老机制的理论学说

三、自然衰老细胞的组织形态学特征

第二节 生殖系统与自然衰老

一、下丘脑—垂体—性腺轴与衰老

二、衰老过程中性腺的组织形态学变化

第三节 女性生殖系统自然衰老的研究现状

一、现代医学关于女性自然衰老的重要理论学说

二、中国传统医学关于女性自然衰老的重要理论学说

综述参考文献

第二部分 实验研究

第一节 材料

一、主要实验仪器设备

二、实验动物

第二节 方法

一、实验观测指标的评测标准

二、卵巢及子宫组织的苏木精-伊红染色（HE染色）

三、数据的统计分析

第三节 结果

一、不同月龄SD大鼠卵巢的组织形态学变化

二、不同月龄SD大鼠子宫的组织形态学变化及规律

第四节 讨论

一、自然衰老的SD大鼠卵巢组织形态学特征的研究现状

二、自然衰老的SD大鼠子宫组织形态学特征的研究现状

第三部分 结语

参考文献

附录Ⅰ 英文缩略词表

附录Ⅱ 论文彩图

附录Ⅲ 硕士期间发表论文

致谢