神清喷鼻微乳的工艺、质量评价及大鼠脑靶向研究

摘要

近年来，我国老年痴呆发病率持续提高，是引起老年人死亡的重大疾病因素，影响家庭的幸福，给国家和社会带来极大地负担。因此，我国致力于开发有效预防和治疗老年痴呆的药物。
　　我国中医药发展历史悠久，资源丰富，留下了很多治疗老年痴呆的中药处方。经统计，在所有的抗老年痴呆的中药方剂中，石菖蒲是使用频率最高的单味药材，以其为主的药对药组是治疗老年性痴呆方剂的基本结构。近十年来，本课题组对石菖蒲开展了广泛而深入的研究，通过药效学研究和药理毒理学研究，证实中药石菖蒲的主要成分β-细辛醚与丁香酚按一定的比例配伍能治疗老年痴呆，并且安全有效。
　　目前预防和治疗老年痴呆病的大部分制剂为注射剂和口服片剂。鼻腔给药是近年来研究的热点，药物可以通过鼻腔嗅神经通路、嗅粘膜上皮通路直接吸收进入脑组织实现脑靶向。故本课题以微乳为载体将药物设计成鼻腔喷雾给药系统，使之成为一种替代静脉注射和口服给药以外的的治疗老年痴呆病的新型给药系统。
　　目的：（1）筛选神清喷鼻微乳的处方及其制备工艺，制备澄清、透明、性质稳定的神清喷鼻微乳；（2）对神清喷鼻微乳进行理化性质考察和稳定性评价，并建立微乳中β-细辛醚和丁香酚的含量测方法；（3）考察神清喷鼻微乳的脑靶向特点。
　　方法：（1）根据处方中药物比例及特性，以药用微乳制剂质量标准为原则，通过溶解度实验、随机配伍实验和微乳相图研究筛选出微乳的处方，通过分散强度、混合顺序、搅拌时间、温度等因素考察法确定微乳成型工艺；（2）通过染色法确定微乳类型；通过离心观察是否分层、黏度、乳剂pH值、粒径及其分布等指标考察神清喷鼻微乳的理化性质；采用HPLC法测量微乳中β-细辛醚和丁香酚含量；通过离心稳定性、高温灭菌实验、强光照射实验、高温试验、低温试验、留样稳定性试验初步考察神清喷鼻微乳的稳定性；（3）按9.0mg/kg的剂量鼻腔给予神清喷鼻微乳后用HPLC法测量药物在血中及脑中的浓度，并以静脉注射自制微乳注射液为对照，采用AUCbrain/AUCplasm方法考察了鼻腔给药的脑靶向性。
　　结果：（1）优化的最优处方组合为混合药物-油酸乙酯-聚氧乙烯蓖麻油(EL-35）-(1，2-丙二醇)质量比为1:1:4:1。微乳的制备工艺是：选择磁力搅拌作为分散动力，采用加水法，在25℃条件下搅拌30min。通过验证工艺制备的微乳澄清、透明、有蓝色乳光。（2）神清喷鼻微乳为O/W型微乳；离心所得微乳澄清透明，无分层现象；黏度约为10 m.Pa.s，其黏度适中；pH值为6.5，符合喷鼻给药规定；粒径约为22.5nm，且粒径较小分布均匀。神清喷鼻微乳中β-细辛醚的含量约为20mg/mL，丁香酚的含量为6.0mg/mL。神清喷鼻微乳离心后稳定，高温灭菌后微乳澄清透明，平均粒径小于100nm，符合微乳粒径规定；在强光照下神清喷鼻微乳稳定性良好；在40℃条件下微乳体系不稳定，微乳的表面性状改变；在-40℃低温条件下微乳会发生絮凝，粒径和分散系数增大，β-细辛醚和丁香酚的含量下降较大；常温条件下放置6个月，微乳的外观、粒径大小及分布、药物含量等指标基本未发生变化；（3）鼻腔给药后得到的AUCbrain/AUCplasm值均高于静脉注射。
　　结论：（1）所筛选的神清喷鼻微乳的处方和制备工艺可行，制备的微乳透明、均匀、稳定、有蓝色乳光；（2）所制备微乳理化性质比较稳定，符合鼻腔给药制剂的标准；微乳中β-细辛醚和丁香酚的含量测定方法适用于神清喷鼻微乳的质量控制；微乳在强光照下稳定，在高温和低温下不稳定，性状、粒径和药物含量有较大变化，所以神清喷鼻微乳应在适宜的温度下贮存；在常温下微乳外观性状及各质量指标基本未发生变化，性质稳定；（3）鼻腔给予含药微乳系统后脑靶向性良好，有望成为治疗老年痴呆的新型给药途径。

目录

声明

引言

第一部分 文献研究

1.老年性痴呆研究进展

1.1老年痴呆的简介

1.2中国治疗老年痴呆的药物及其剂型简述

2.石菖蒲的研究进展

2.1石菖蒲的临床作用研究

2.2石菖蒲的主要化学成分

2.3β-细辛醚的研究进展

3.丁香酚在老年痴呆症治疗应用方面的研究

4.药物由鼻腔转入脑的研究现状和发展趋势

5.微乳的靶向性研究

6.脑靶向的给药系统和评价方式简介[51]

6.1脑靶向的给药系统和相关研究药物

6.2脑靶向的评价方式

第二部分 实验研究

第一章 神清微乳鼻腔给药系统的处方前研究

1.β-细辛醚的提取与精制

2.β-细辛醚和丁香酚的油/水分配系数

3.HPLC法测定β-细辛醚和丁香酚的液相条件筛选

4.讨 论

第二章 神清喷鼻微乳系统的制备

1.仪器与试药

2.微乳处方组成筛选

3.单因素考察微乳制备的工艺

4.制备工艺的验证

5.讨 论

第三章 神清喷鼻微乳的理化性质和稳定性评价

第一节 神清喷鼻微乳的理化性质

第二节 神清喷鼻微乳中β-细辛醚和丁香酚的含量测定

第三节 神清喷鼻微乳初步稳定性考察

第四章 神清喷鼻微乳大鼠脑靶向研究

1.仪器、试药与动物

2.体内药物分析方法的建立

3.神清喷鼻微乳在大鼠体内的研究

4.讨 论

第三部分 结语

1.实验总结

2.问题与展望

2.1微乳处方筛选

2.2安全性评价

2.3脑靶向研究

参考文献

在校期间发表论文与参与科研课题情况

发表论文

参与课题

致谢