针刺对HIBD模型大鼠远期行为学及Ca2+浓度、LDH活性的影响

摘要

新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是新生儿时期常见的危重症候，围生期各种原因所导致的宫内窘迫（宫内窒息）是其发病的主要原因，据有关资料显示，我国新生儿死亡原因有1/3为HIE所致，是新生儿死亡的主要原因[1]，即使幸存患儿亦有35％遗留有严重的神经系统后遗症，如智力低下、脑性瘫痪、癫痫、视力障碍、耳鸣耳聋等证。严重影响患儿未来的生活和发展，给患儿家庭带来沉重的打击，亦给社会增加了巨大的负担。因此，对新生儿HIE早期的诊断，及时有效的治疗干预，以及病后的康复有重要意义。 研究目的: 本文通过研究针刺“靳三针头穴”对缺氧缺血性脑损伤HIBD大鼠远期行为学表现，脑组织中Ca2+浓度及乳酸脱氢酶LDH活性影响，以期探讨针刺对新生儿HIBD的作用机制。另一方面，根据通过比较不同针刺介入时间对HIBD大鼠损伤远期行为学及相关指标的影响，为临床针刺寻找最佳针刺治疗时间提供理论依据。 研究方法: 本实验通过采用延迟剖宫产术，钳夹孕鼠双侧子宫动脉的方法模拟宫内窘迫制作HIBD大鼠模型。设立正常组、模型组、针刺1组、针刺2组、针刺3组、针刺4组、针刺5组、针刺6组、针刺7组、针刺8组、针刺9组。正常组幼鼠为自然分娩的新生幼鼠，模型组及针刺组1～9为行延迟剖宫产后的幼鼠。针刺1～9组分别到出生后第14d、17d、20d、24d、27d、30d、34d、37d、40d开始行针刺干预。针刺每天上午进行，连续针刺7天。之后在预定时间点进行行为学检测（悬吊实验、斜坡实验、旷场试验），第49天全部处死取脑，制作脑组织匀浆，测定脑组织匀浆中Ca2+浓度及LDH活性 结果: 1.49d（针刺后）行为学实验结果 (1)悬吊实验结果: 与模型组比较，针刺1～5组悬吊时间均高于模型组(P＜0.01)，其余各针刺组（针刺6～9组）与模型组比较，无统计学差异(P＞0.05);各针刺组之间的比较，与针刺1组相比，针刺6～9组悬吊时间均低于针刺1组(P＜0.05);与针刺2组比较，针刺6～9组悬吊时间均低于针刺2组(P＜0.05);与针刺3组相比，针刺6～9组悬吊实验均低于针刺3组(P＜0.05);与针刺4组相比较，针刺7～9组悬吊时间均低于针刺4组(P＜0.05);与针刺5组相比，针刺7～9组悬吊时间均低于针刺5组(P＜0.05)。 (2)斜坡实验结果: 与模型组比较，针刺1～7组斜坡时间均低于模型组(P＜0.05);针刺8、9组与模型组比较无统计学差异(P＞0.05)。 (3)旷场试验结果: 根据方差分析F=1.401，(P＞0.05)，组间差异无统计学意义。 2.相同时点(49d)不同组Ca2+浓度的比较 与正常组相比，模型组脑匀浆中Ca2+浓度高于正常组(P＜0.01);与模型组相比，针刺1、2、3、5组脑匀浆中Ca2+浓度均低于模型组(P＜0.05)，其余各针刺组（针刺4、6、7、8、9组）与模型组比较无统计学差异(P＞0.05);与针刺1组相比，针刺3～9组脑匀浆中Ca2+浓度均高于针刺1组(P＜0.05);与针刺2组相比，针刺4、6、7、8、9组脑匀浆中Ca2+浓度均高于针刺2组(P＜0.05);其余各组间无统计学差异(P＞0.05)。 3.相同时点(49d)不同组LDH活性的比较 与正常组相比，模型组脑匀浆中LDH活性高于正常组(P＜0.05);与模型组相比，针刺1～4组脑匀浆中LDH活性均低于模型组(P＜0.05);其余各针刺组（针刺5～9组）与模型组比较无统计学差异(P＞0.05);与针刺1组相比，针刺4～9组脑匀浆中LDH活性均高于针刺1组(P＜0.05);与针刺2组相比，针刺6～9组脑匀浆中LDH活性均高于针刺2组(P＜0.05);与针刺3组相比，针刺6、8、9组脑匀浆中LDH活性均高于针刺3组(P＜0.05);与针刺4组相比，针刺9组脑匀浆中LDH活性高于针刺4组(P＜0.05);其余各组间无统计学差异(P＞0.05)。 结论: 1.针刺可有效改善HIBD大鼠远期行为学能力（肌力、平衡协调能力及情感认知能力等）。而且，针刺介入时间越早，治疗效果越显著，反之，针刺介入时间越晚治疗效果就越差，甚至无效。 2.(1)缺氧缺血性脑损伤会造成大鼠脑匀浆中Ca2+超载;(2)第14天开始介入针刺治疗能有效抑制HIBD大鼠脑组织中Ca2+超载现象，是针刺最佳介入时间点;(3)针刺治疗介入时间越早，对HIBD大鼠脑匀浆中Ca2+超载的抑制作用就越明显，反之，针刺治疗介入时间越晚对HIBD大鼠脑匀浆中Ca2+超载的抑制作用就越差，甚至无效。 3.(1)缺氧缺血性脑损伤会造成大鼠脑组织内LDH活性升高;(2)第14天介入针刺治疗能有效抑制HIBD大鼠脑匀浆中LDH活性，是针刺介入治疗的最佳时间;(3)针刺介入时间越早，对HIBD大鼠脑匀浆中LDH活性抑制作用就越明显，反之，针刺介入时间越晚对HIBD大鼠脑匀浆中LDH活性抑制就越差，甚至无效。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献综述

第一节 现代医学对新生儿HIE的研究进展

一、现代医学对新生儿HIE损伤机制的认识

二、现代医学对新生儿HIE的治疗

第二节 中医学对新生儿HIE的研究进展

一、中医对新生儿HIE病因病机的认识

二、中医在治疗新生儿HIE的进展

第三节 靳三针治疗新生儿HIE的概述

一、靳三针认识新生儿HIE与调神的关系

二、靳三针在治疗新生儿HIE具体穴位的选择

第二章 实验研究

第一节 实验材料与方法

一、实验动物

二、动物实验室

三、动物的饲养

四、实验用品

五、实验方法

第二节 实验结果

一、行为学实验结果

二、Ca2+浓度结果

三、LDH活性结果

第三节 讨论

一、行为学检测

二、Ca2+浓度测定

三、LDH活性测定

第三章 实验间相关性分析与讨论

第一节 行为学检测与生化指标间的关系

一、同一时间点(49d)行为学检测与生化指标间相关性分析

二、讨论

三、结论

第二节 针刺穴位的选择

第四章 结语

第一节 结论

一、理论研究

二、实验研究

第二节 本实验的创新点

第三节 本次试验的不足及展望

参考文献

附录

附录1：中英文对照与缩略词表

附录2：流式细胞仪测出各组Ca2+浓度图

在校期间发表论文情况

致谢