慢性心力衰竭中医证型与舌苔菌群构成的相关性研究

摘要

目的:
　　探讨慢性心力衰竭患者与健康人之间、慢性心力衰竭患者不同中医证型之间的舌苔菌群构成差异。
　　方法:
　　纳入广州中医药大学第一附属医院以及广东省中医院住院部慢性心力衰竭患者，辨证分型为气阳虚血瘀水停证（简称阳虚组）以及气阴虚血瘀水停证（简称阴虚组），以及体检中心的健康人。收集患者一般资料、个人史、慢性心力衰竭相关临床资料，舌像等。并对所有研究对象进行舌苔取样，提取舌苔样本DNA基因组，通过Illumina测序得到样本中细菌的碱基序列，并进行生物信息分析，得出所有样本中菌群信息，分析样品中菌群的丰度、多样性，以及组间差异，得出结论。
　　结果:
　　1.筛选60例符合慢性心力衰竭诊断患者，其中18例入院已使用抗生素，实际纳入慢性心力衰竭阳虚组19例、阴虚组23例;筛选30例健康人，其中1例1周内有上呼吸道感染史，实际纳入健康组29例。
　　2.三组在性别上无明显差异，慢性心力衰竭阳虚组及阴虚组在年龄、吸烟饮酒史、心功能分级、慢性心衰病程组间无明显差异。
　　3.慢性心力衰竭阳虚组舌色以淡暗为主，阴虚组舌色以暗红、红为主，健康组舌色以淡红为主。慢性心力衰竭阳虚组苔质以腻或微腻苔为主，阴虚组以少苔或薄苔为主，健康组以薄苔为主。
　　4.测序质量良好，过滤后得到4092353对reads，除健康组80号样本测序后reads数过低，予以剔除。
　　5.本次70个样本测序，共测出1个界(superkingdom)、12个门(phylum)、21个纲(class)、32个目(order)、54个科(family)、89个属(genus)。
　　6.稀释性曲线、Shannon-Wiener曲线反应本次测序深度已足够。
　　7.PCA、群落Heatmap、Weighted UniFrac分析示阳虚组、阴虚组、健康组在舌苔菌群的丰度及多样性未见明显差异。但阳虚组、阴虚组、健康组在菌群构成结构上有不同的变化趋势，表现为慢性心力衰竭两组舌苔菌群中Prevotella（普雷沃氏菌属）、Veillonella（韦荣球菌属）含量减低，同时Neisseria（奈瑟氏菌属）含量升高。慢性心力衰竭的气阳虚血瘀水停较气阴虚血瘀水停证舌苔菌群中呈Streptococcus（链球菌属）含量降低，Fusobacterium（梭杆菌属）含量升高的趋势。
　　结论:
　　慢性心力衰竭患者与健康人之间、慢性心力衰竭气阳虚血瘀水停与气阴虚血瘀水停证之间在舌苔菌群的丰度及多样性上无明显差异，但在菌群构成结构上有不同的变化趋势，表现为慢性心力衰竭两组舌苔菌群中Prevotella（普雷沃氏菌属）、Veillonella（韦荣球菌属）含量减低，同时Neisseria（奈瑟氏菌属）含量升高。慢性心力衰竭的气阳虚血瘀水停组较气阴虚血瘀水停组舌苔菌群中呈Streptococcus（链球菌属）含量降低，Fusobacterium（梭杆菌属）含量升高的趋势。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献研究

第一节 慢性心力衰竭中医研究现状

一、中医对心力衰竭的认识

二、心力衰竭病因病机

三、中医药治疗心力衰竭

第二节 舌苔微生物研究进展

一、正常舌苔微生物构成

二、舌苔微生物失调的表现及其影响因素

三、中医中舌与五脏及疾病的关系

四、舌苔微生物失调与疾病的相关性

五、前景和展望

第三节 展望

第二章 研究方案

一、研究目标

二、研究内容

三、一般资料

四、研究方法

五、技术路线图

六、临床相关指标采集

七、舌苔样本收集

八、舌苔组织DNA提取

九、样本DNA质检、文库构建、MiSeq测序仪测序及数据质控

十、统计学方法

第三章 研究结果

一、一般资料比较

二、DNA样本质量检测结果

三、文库质检

四、测序结果

五、生物信息学分析

第四章 讨论

一、DNA提取及Illumina测序

二、健康组舌苔菌群结果浅析

三、慢性心力衰竭对舌苔菌群的影响

四、影响舌苔菌群构成的因素

五、心开窍于舌理论探讨

六、不足与展望

结语

参考文献

附录

在校期间论文发表情况

致谢