益脑素改善学习记忆功能的作用及机制的实验研究

摘要

目的:
　　通过东莨菪碱、亚硝酸钠以及乙醇分别建立记忆获取障碍模型、记忆巩固障碍模型和记忆再现障碍模型，并采用中药提取物益脑素进行干预，观察益脑素对于大脑记忆行为的保护作用。并以此为基础，探究益脑素对记忆重要相关因子谷氨酸、γ-氨基丁酸和乙酰胆碱酯酶的影响。并且探讨益脑素对于突触前膜因子Syp和突触后膜蛋白PSD-95的影响。
　　方法:
　　①利用Morris水迷宫实验，探究益脑素对正常小鼠记忆能力的影响;
　　②利用Morris水迷宫实验及跳台实验，探究益脑素对东莨菪碱造成的记忆获取障碍模型的影响;
　　③利用跳台实验，探究益脑素对亚硝酸钠造成的记忆巩固障碍模型的影响;
　　④利用跳台实验，探究益脑素对乙醇造成的记忆再现障碍模型的影响;
　　⑤利用东莨菪碱造小鼠记忆障碍模型，探究益脑素对神经递质谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影响，以及对乙酰胆碱酯酶活性的影响;
　　⑥利用东莨菪碱造小鼠记忆障碍模型，使用免疫组化技术、Western Blotting及RT-PCR技术，探究益脑素对于突触前膜突触囊泡蛋白及突触后膜致密结构蛋白表达的影响。
　　结果:
　　①正常小鼠记忆能力的影响，Morris水迷宫实验结果:与正常组比，吡拉西坦片组、益脑素高剂量组动物逃避潜伏期显着缩短;吡拉西坦片组、益脑素高、中剂量组动物穿台次数显着增加;吡拉西坦片组、益脑素高剂量组动物平台周边活动路程和时间或中央活动路程和时间均显着增加。
　　②对东莨菪碱造成的记忆获取障碍模型的影响，Morris水迷宫实验结果:与正常组相比，模型组动物逃避潜伏期显着延长，平台周边活动路程和时间显着缩短，穿台次数显着减少中央活动路程和时间也有所缩短，提示模型动物出现学习记忆障碍。与模型组相比，吡拉西坦片组、益脑素高、中、低组动物逃避潜伏期显着缩短，平台周边活动路程和时间或中央活动路程和时间均有不同程度的增加。跳台实验结果:与正常组相比，模型组动物潜伏期缩短，错误次数、错误动物数显着增加，提示动物出现学习记忆障碍。与模型组相比，吡拉西坦片组、益脑素高、中剂量组动物潜伏期有所延长，错误次数也有减少的趋势，但差异无统计学意义。
　　③对亚硝酸钠造成的记忆巩固障碍模型的影响，跳台实验结果:与正常组相比，模型组动物潜伏期缩短，错误次数、错误动物数显着增加，提示造模成功。与模型组相比，吡拉西坦片组、益脑素低、中、高剂量组组动物潜伏期有所延长，错误次数也有减少的趋势，但差异无统计学意义。
　　④对乙醇造成的记忆再现障碍模型的影响，跳台实验结果:与正常组相比，模型组动物潜伏期缩短，错误次数、错误动物数显着增加，提示造模成功。与模型组相比，吡拉西坦片组、益脑素低、中剂量组动物错误次数显着减少，益脑素低剂量组动物潜伏期、错误动物只数显着减少。
　　⑤对神经递质谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影响，以及对乙酰胆碱酯酶活性的影响:与正常组相比，模型组动物AChE活性显着增强，Glu及γ-GABA含量显着降低，提示造模成功。与模型组相比，吡拉西坦片组、益脑素低、中、高剂量组动物AChE活性显着减少，吡拉西坦片组、益脑素低剂量组动物Glu及γ-GABA含量显着增加。
　　⑥对突触前膜突触囊泡蛋白及突触后膜致密结构蛋白表达的影响:与正常组相比，模型组动物Syp基因表达量显着下降，PSD-95基因表达量显着上升。与模型组相比，吡拉西坦片组、益脑素低、高剂量组动物Syp基因表达量显着增加，益脑素低、中剂量组动物PSD-95基因表达量显着降低。WB实验结果与基因表达量有着相同的趋势。
　　结论:
　　益脑素能够增强正常小鼠的记忆能力，并且改善由东莨菪碱、亚硝酸钠和乙醇造成的记忆障碍。其作用机制可能是通过增加谷氨酸及γ-氨基丁酸含量，减弱乙酰胆碱酯酶活性，增强Syp表达和减弱PSD-95表达来实现的。

目录

声明

摘要

引言

第一部分 文献研究

第一章 学习记忆及其与神经系统的现代研究

第一节 学习记忆与相关脑区

第二节 学习记忆与神经递质

第三节 学习记忆与突触可塑性

第二章 学习记忆障碍模型及实验研究进展

第一节 造模方法研究进展

第二节 行为学研究

第三节 学习记忆的分子学实验研究进展

第三章 改善学习记忆的药物研究

第一节 化学药物

第二节 天然药物-中药

第二部分 实验研究

第一章 益脑素改善学习记忆的行为学研究

第一节 益脑素对正常小鼠学习记忆能力的影响

第二节 益脑素对东莨菪碱所致的空间记忆障碍模型小鼠的影响

第三节 益脑素对亚硝酸钠所致的学习记忆巩固障碍模型小鼠的影响

第四节 益脑素对乙醇所致的学习记忆再现障碍模型小鼠的影响

第二章 益脑素对东茛菪碱致学习记忆获得障碍小鼠神经递质的影响

第三章 益脑素对东莨菪碱致学习记忆获得障碍小鼠突触可塑性的影响

第一节 益脑素对东茛菪碱致学习记忆获得障碍小鼠海马区SYP、PSD-95分布的影响

第二节 益脑素对东莨菪碱致学习记忆获得障碍小鼠海马区SYP mRNA、PSD-95 mRNA表达的影响

第三节 益脑素对东莨菪碱致学习记忆获得障碍小鼠海马区SYP、PSD-95蛋白表达的影响

第三部分 结语

参考文献

附录

致谢