西藏红缨合耳菊提取物的美白机理研究

摘要

西藏红缨合耳菊(synotis erythropappa (Bur. et Franch.) C.Jeffrey et Y.L.Chen)为菊科(Compositae)植物，属西藏特有植物。产于西藏东南部，西藏当地女性将红缨合耳菊捣碎、烧成灰等后，敷在皮肤表面用于皮肤保养及紫外线防护。黑色素的大量产生是皮肤变黑的重要原因，人体中酪氨酸酶是催化酪氨酸形成多巴，以及多巴形成多巴醌，并最终产生黑色素的关键酶。羟自由基是人体内产生的不稳定的且具有强氧化性的物质，与人体的衰老有密切的联系，氧自由基同样对人体的衰老有密切关系，同时它也在黑色素的形成过程中起到氧化的作用。当自由基大量产生，又得不到有效的清除时，会导致机体组织不断老化。 本文通过研究红缨合耳菊提取物的美白机理，包括红缨合耳菊提取物对酪氨酸酶的抑制作用、B16 细胞的影响、自由基清除作用等，探讨了红缨合耳菊在美白方面的功效。取得的结果如下： 一、以酪氨酸为底物，探讨红缨合耳菊提取物酪氨酸酶单酚酶的抑制效果。结果表明红缨合耳菊提取物的乙酸乙酯及正丁醇萃取部分有较强的抑制能力，对酪氨酸酶单酚酶的半数抑制浓度IC50分别为57.8、140/μg/mL。并能使抑制过程产生延迟作用。 二、以多巴为底物探讨红缨合耳菊提取物酪氨酸酶双酚酶的抑制效果。结果表明红缨合耳菊提取物的乙酸乙酯及正丁醇萃取部分有较强的抑制能力，对双酚酶的半数抑制浓度IC50分别为41.2、59.6 μg/mL。通过动力学实验得出抑制类型分别为竞争性抑制以及非竞争性抑制。 三、探讨了红缨合耳菊提取物对B16细胞的影响，结果表明红缨合耳菊提取物对细胞形态和生长均有一定的抑制作用，其中以乙酸乙酯萃取部分最大320μg/mL时细胞生长抑制率可达到65.67％，而正丁醇萃取部分及水溶部分仅为10％左右。 四、红缨合耳菊提取物在抗氧化方面的研究，探讨红缨合耳菊提取物对DPPH和氧自由基的清除作用量。对羟自由基的清除作用在一定程度上可以与抗坏血酸相媲美。乙酸乙酯、正丁醇萃取部分半数清除率IC50分别为2.51、5.12μg/mL，与抗坏血酸的IC50值2.42μg/mL相差不多，对氧自由基的半数抑制浓度IC50分为0.27、0.39 mg/mL。 上述实验证明红缨合耳菊提取物具有抑制酪氨酸酶单酚酶及双酚酶的作用，对细胞有一定的毒性，此外还具有清除自由基、抗氧化损伤、抗衰老的双重功效。有望用于美白护肤和抗衰老型化妆品中。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1研究背景

1.1.1概述

1.1.2红缨合耳菊

1.1.3美白化妆品功效评价的主要方法

1.1.4酪氨酸酶

1.1.5自由基

1.2国内外研究现状

1.2.1化妆品美白剂的发展

1.2.2植物源美白剂

1.3立题依据及选题意义

1.4主要研究内容

1.5课题来源

第二章西藏红缨合耳菊对酪氨酸酶抑制作用

2.1前言

2.2材料与仪器

2.2.1材料

2.2.2仪器

2.3实验方法

2.3.1提取分离方法

2.3.2酪氨酸酶活性抑制的测定

2.3.3酪氨酸酶抑制类型的测定

2.4实验结果

2.4.1红缨合耳菊的提取分离

2.4.2对酪氨酸酶单酚酶活力的影响

2.4.3对酪氨酸酶单酚酶活性的迟滞影响

2.4.4对酪氨酸酶双酚酶活力的影响

2.4.5对酪氨酸酶抑制类型

2.5讨论

2.6本章小结

第三章西藏红缨合耳菊对B16细胞的影响

3.1前言

3.2材料与仪器

3.2.1材料

3.2.2仪器

3.3实验方法

3.3.1细胞的培养及接种

3.3.2倒置显微镜观察

3.3.3黑色素细胞增殖抑制率测定

3.4实验结果与讨论

3.4.1显微镜观察

3.4.2黑色素细胞增值率

3.5本章小结

第四章西藏红缨合耳菊对自由基的清除能力

4.1前言

4.2材料与仪器

4.2.1材料

4.2.2仪器

4.3实验方法

4.3.1对DPPH自由基的清除作用

4.3.2对氧自由基的清除作用

4.4实验结果

4.4.1体系显色稳定性实验

4.4.2对DPPH的清除作用研究

4.4.3抑制氧自由基的作用

4.5讨论

4.6本章小结

结论

参考文献

读学位期间发表的论文

致谢