紫红笛鲷（♀）×红鳍笛鲷（♂）杂交F代与其亲本的遗传分析

摘要

本研究从形态学、细胞学、分子生物学水平对紫红笛鲷(♀)×红鳍笛鲷(♂)杂交F1代与其亲本的遗传学关系进行分析，为海水鱼类的杂交育种提供参考依据；并从红鳍笛鲷基因组文库中开发了一批微卫星标记，以期加快这些重要海水养殖鱼类在遗传变异分析、分子标记辅助育种、重要经济价值基因定位及遗传图谱构建等方面的研究工作。本文的主要工作及结论如下： 1.紫红笛鲷♀与红鳍笛鲷♂杂交子代及其亲本的形态学分析以紫红笛鲷为母本，红鳍笛鲷为父本，获得杂交一代。随机采集杂交笛鲷F1及其原始亲本各30尾，通过测定其形态和框架数据，用卡方分析、聚类分析、判别分析，比较了它们之间的形态异同。可数性状卡方分析表明，鳃耙、背鳍条、背鳍棘、胸鳍条、臀鳍条在3种鱼间差异极显著，侧线上鳞、侧线下鳞差异显著；侧线鳞差异不显著；腹鳍条、腹鳍棘、臀鳍棘数目在3种鱼之间完全一致。从可量性状上看，3种鱼在体长/3-6、体长/3-8、体长/5-8，体长/3-6等4个参数间的差异最大。这些参数主要反映出不同鱼种间躯干部高度上的差异。类聚分析表明，杂交子代在可数性状上偏向母本紫红笛鲷，在可量性状和框架特征上偏向父本。判别结果表明，判别效果较显著。紫红笛鲷和红鳍笛鲷判别准确率分别为100％，杂交子代判别准确率分别为86.3％，平均拟合概率95.4％。 2.紫红笛鲷♀与红鳍笛鲷♂杂交子代及其亲本的核型研究采用胸腔活体注射PHA及秋水仙素溶液，取头肾细胞，低渗处理，空气干燥法制片，对染色体进行Giemsa染色来研究红鳍笛鲷♀与千年笛鲷♂杂交子代及其双亲的核型，结果表明，杂交子代及其亲本的核型均为2n=48t，NF=48，符合遗传理论。 3.紫红笛鲷(♀)×红鳍笛鲷(♂)杂交F1代及其亲本遗传变异的RAPD分析采用随机扩增多态性DNA(RAPD)标记技术对紫红笛鲷(♀)×红鳍笛鲷(♂)杂交F1代及其亲本的遗传结构进行了初步研究。从100个随机引物筛选出20个扩增带丰富的引物进行扩增，共产生106条清晰稳定的扩增带。紫红笛鲷、F1、红鳍笛鲷的多态位点的比例分别是：46.23％、57.55％、4.91％。紫红笛鲷、F1、红鳍笛鲷3群体的Nei多样性指数和Shannon信息指数分别为：0.1661、0.2555、0.1450:0.2465、0.3638、0.2086。紫红笛鲷-F1，红鳍笛鲷-F1，紫红笛鲷-红鳍笛鲷的遗传距离分别为0.2393，0.2969，0.657。从相似性指数、Nei多样性指数和Shannon信息指数均显示F1代具有更大的遗传变异行；从遗传距离可以看出，F1更多地继承了母本紫红笛鲷的遗传物质。 4.紫红笛鲷(♀)×红鳍笛鲷(♂)杂交子代F1及其亲本遗传变异的微卫星标记分析利用9个微卫星引物对杂交笛鲷及其亲本共3个群体的等位基因频率、有效等位基因数、杂合度、Shannon信息指数及3群体间遗传距离进行了遗传检测，总共检测到30个等位基因，平均每个基因座位3.33个等位基因。紫红笛鲷、F1、红鳍笛鲷三个群体的有效等位基因数、杂合度、Shannon信息指数分别为2.9092、2.6295、2.3594:0.6508、0.9683、0.5608和0.9338、1.0091、0.7762。紫红笛鲷-F1，F1-红鳍笛鲷，紫红笛鲷-鳍笛鲷的遗传距离分别为0.4215，0.5273，0.963。结果说明杂交子代F1来自母本(紫红笛鲷)的遗传物质比父本(红鳍笛鲷)要多一些。 5.红鳍笛鲷微卫星DNA的筛选提取红鳍笛鲷基因组DNA，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切并电泳回收300-1000bp的片段与经BamHⅠ和HindⅢ双酶切的pUC18质粒重组，构建红鳍笛鲷小片段DNA文库。采用PCR法筛选获得24个红鳍笛鲷微卫星序列，其中完美型占58.3％，非完美型占25.0％，复合型占16.7％。进一步用引物设计软件PrimerPremier5.0设计引物12对。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写与译文

声明

第一章文献综述

第一节笛鲷属鱼类种质资源的研究进展

1笛鲷属的种类、分布

2笛鲷属鱼类种质资源的研究进展

3建议与展望

第二节紫红笛鲷与红鳍笛鲷的研究概况

1紫红笛鲷与红鳍笛鲷的分类地位与分布

2生物学特征

3养殖现状

4养殖中存在的主要问题

第三节鱼类杂交育种

1鱼类杂交育种概述

2远缘杂交在水产养殖上的应用

3杂交种的鉴定

第四节本项目研究的目的和意义

1本项目研究的目的

2本项目研究的意义

第二章实验部分

第一节紫红笛鲷♀早与红鳍笛鲷♂杂交子代及其亲本的形态学分析

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

第二节红鳍笛鲷♀与千年笛鲷♂杂交子代及其亲本的核型研究

1材料与方法

2结果

3讨论

第三节紫红笛鲷(♀)×红鳍笛鲷(♂)杂交F1代及其亲本遗传变异的RAPD分析

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第四节紫红笛鲷(♀)×红鳍笛鲷(♂)杂交子代F1及其亲本遗传变异的微卫星标记分析

1实验材料

2结果与分析

3讨论

第五节红鳍笛鲷微卫星DNA的筛选

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

第三章总结

参考文献

致谢

作者在读期间科研成果简介