恩度联合培美曲塞作用于肺腺癌的基础研究

摘要

目的：研究恩度联合培美曲塞对肺腺癌的联合作用，并进一步探讨恩度的抗血管生成及抑制细胞转移的作用机制。
　　方法：⑴应用ADP-GLO法检测恩度，培美曲塞及两药联合对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC），肺腺癌细胞株（A549）增殖抑制率。⑵在上述药物作用下，应用细胞侵袭实验测药物对细胞运动能力的影响。⑶应用恩度作用于内皮细胞的VEGF受体，利用酪氨酸激酶（KDR）抑制剂检测恩度对VEGF的信号通路影响。⑷应用基质金属蛋白酶（MMP-2）明胶酶谱的方法检测通过上述药物处理后的HUVEC中MMP-2表达的变化。
　　结果：①培美曲塞对A549细胞株细胞具有明显的增殖抑制作用。而恩度对其无明显抑制作用，两药联合与培美曲塞单药应用均无统计学意义（P>0.05）。培美曲塞对HUVEC细胞株的增殖抑制作用不太明显，而恩度对其具有较强抑制作用，两药联合后增殖抑制作用增强（P<0.05）。②恩度对HUVEC细胞株有抑制细胞运动能力的作用。③恩度及培美曲塞对VEGF受体磷酸化无明显影响（P>0.05）。④恩度组与空白对照组比较MMP-2蛋白的表达明显下降。
　　结论：⑴恩度联合培美曲塞对人血管内皮细胞的增殖，具有明显的抑制作用。两药联合有协同作用。⑵恩度对A549细胞株的增殖无抑制作用。⑶恩度及培美曲塞对VEGF受体的磷酸化无明显作用。⑷恩度作用于HUVEC细胞后，MMP-2蛋白的表达明显下降。恩度的作用机制与MMP-2有相关性。

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一 前 言

二 材料与方法

2.1药物与试剂

2.2细胞株及细胞培养

2.3主要仪器与设备

2.4 ADP-GLO法检测药物对HUVEC，A549增殖抑制实验

2.5内皮细胞划痕实验

2.6．VEGF的磷酸化1 Endo （250 uM）

2.7 MMP-2明胶酶谱实验

2.8统计学处理

三 结果

1.细胞抑制率

2.内皮细胞划痕实验

3.VEGF 的磷酸化

4.MMP-2 明胶酶谱的表达

四 讨 论

4.1 A549，HUVECs细胞抑制率

4.2 抑制细胞运动侵袭力

4.3 VEGF的磷酸化

4.4 MMP-2明胶酶谱

4.5应用前景

五 结论

参考文献

附录A英中文术语缩略语对照表

附录B 综述: 重组人血管内皮抑素抗肿瘤机制及临床应用的研究进展

附图