石斛兰种质资源鉴定评价

摘要

本研究以石斛兰为研究试材,从植物学性状、农艺学性状、细胞学性状和分子生物学方面对石斛兰种质资源进行鉴定评价,为进一步利用石斛兰种质打下基础。具体如下:
　　 对40份石斛兰种质的植物学性状、农艺学性状进行了较为全面的观察,按观赏特性可分为迷你小花型、蝴蝶石斛型、羚羊角石斛型三种类型。
　　 通过对模板DNA、dNTP、引物含量、Mg2+浓度、Taq酶、5因素的优化,建立了适合石斛兰SRAP扩增的反应体系。在SRAP多态性筛选中,从100对引物中筛出20对多态性好的引物组合,多态性条带为295条。通过聚类分析发现,在值为0.618时,可将40份石斛兰种质划分为3大类群。第1类迷你小花型,第Ⅱ类为蝴蝶石斛型,第Ⅲ类为羚羊角石斛型。结果表明,石斛兰种质的聚类与其遗传背景有很大的关系。
　　 通过细胞学标记对12份石斛兰材料染色体进行初步研究,石斛兰的酸解时间为6min并对部分品种进行核型分析(相对长度、臂比、核型公式、核不对称系数等),栽培种的染色体数目较多,有待于进一步研究。
　　 本研究通过植物学和SRAP的结果进行比较分析,发现SRAP结果与植物学和农艺学分析结果有一定得差异,这主要是因为植物学反映的是外部形态的差异,而SRAP标记却是反映DNA水平上的差异。

目录

文摘

英文文摘

1 前言

1.1 石斛兰种质资源研究现状

1.1.1 国外石斛兰种质资源研究现状

1.1.2 国内石斛兰种质资源研究现状

1.2 我国花卉种质资源鉴定评价研究

1.2.1 植物学和农艺学鉴定评价

1.2.2 分子生物学鉴定评价

1.2.3 细胞学鉴定评价

1.2.4 SRAP标记的原理和利用

1.3 研究目的和意义

1.4 研究技术路线

2 植物学和农艺学鉴定评价

2.1 材料

2.2 方法

2.2.1 分类性状的选取和编码

2.2.2 数据处理

2.3 结果

2.3.1 R型聚类结果及分析

2.3.1 Q型聚类结果与分析

3 分子生物学鉴定评价

3.1 材料

3.1.1 实验器材

3.1.2 试验药品

3.2 方法

3.2.1 DNA的提取及检测

3.2.2 PCR反应体系的建立和优化

3.2.3 反应程序

3.2.4 聚丙烯酰胺电泳

3.2.5 SRAP反应的引物筛选

3.2.6 SRAP数据统计

3.3 结果

3.3.1 DNA提取

3.3.2 SRAP-PCR反应体系的优化

3.3.3 SRAP标记结果

3.3.4 石斛兰40份种质资源的遗传多样性分析

4 细胞学鉴定评价

4.1 材料

4.2 方法

4.2.1 染色体制片酸解时间的筛选

4.2.2 染色体的制片过程

4.2.3 染色体核型分析

4.3 结果

4.3.1 染色体制片酸解时间的筛选

4.3.2 染色体数目及核型分析

5 结论与讨论

5.1 结论

5.1.1 植物学和农艺学鉴定评价

5.1.2 分子生物学鉴定评价

5.1.3 细胞学鉴定评价

5.2 讨论

5.2.1 植物学和农艺学鉴定评价

5.2.2 分子生物学鉴定评价

5.2.3 性状鉴定和分子水平鉴定存在差异可能原因

5.2.4 细胞学鉴定评价

参考文献

附录Ⅰ 英文缩略表

致谢