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1 前言
1.1 藻类的概述
1.2 藻类的演化及系统分类
1.3 微藻的研究现状
1.3.1 微藻种质资源研究
1.3.2 微藻的商业化利用现状
1.3.3 高脂微藻的筛选
1.3.4 微藻作为生物能源的开发
1.3.5 微藻规模化养殖中存在的主要问题
1.3.5 育种技术在微藻中的应用
1.4 18S rRNA在系统进化研究中的作用
1.5 微藻脂肪酸的研究
1.5.1 微藻脂肪酸的提取工艺
1.5.2 微藻脂肪酸成分分析
1.6 尼罗红在微藻研究中使用
1.7 本试验研究的目的意义
1.8 本研究技术路线
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.2.1 样品的采集
2.2.1 菌株和质粒
2.2 主要仪器和试剂
2.2.1 主要仪器
2.2.2 主要试剂
2.3 常用培养基的配置
2.4 实验方法
2.4.1 藻株的分离、纯化和培养
2.4.2 藻株的形态学观察和鉴定
2.4.3 微藻分子生物学鉴定
2.4.4 高含油量微藻的筛选
2.4.5 微藻脂肪酸成分分析
3 结果与分析
3.1 微藻种质资源的收集
3.2 微藻基因组DNA的提取
3.3 微藻的分类与鉴定
3.3.1 HKJ-1的种属鉴定
3.3.2 HKJ-2的种属鉴定
3.3.3 HKS-8的种属鉴定
3.3.4 HKS-7的种属鉴定
3.3.5 HKS-1的种属鉴定
3.3.6 HKS-9的种属鉴定
3.3.7 HD-1的种属鉴定
3.3.8 HKS-5的种属鉴定
3.4 一株新种(DWZ-8)的分离、纯化与鉴定
3.4.1 DWZ-8的细胞形态学观察与鉴定
3.4.2 DWZ-8的18S rDNA的结构及其与近缘种的比较
3.4.3 DWZ-8的16S rDNA的结构及其与近缘种的比较
3.4.4 DWZ-8的系统发育分析
3.5 高含油量微藻的筛选
3.5.1 利用尼罗红染色法筛选高含油量微藻
3.5.2 从微藻中提取粗脂的方法比较
3.6 微藻脂肪酸成分分析
3.6.1 海南橡胶藻的脂肪酸成分分析
3.6.2 藻株Hhw的脂肪酸成分分析
4 讨论
4.1 关于海南微藻种质资源的收集及后续资源库建立的研究
4.2 细胞生物学与分子生物学结合对微藻种属鉴定的必要性
4.3 关于电子透射显微镜微藻样品制备
4.4 关于高含油量微藻筛选
4.4 关于微藻作为生物质能源的开发
4.5 关于微藻脂肪酸的成分
5 结论
附录1:一些藻类的显微照片
附录2:DWZ-8的18S rDNA、16S rDNA序列
附录3:部分试剂的配制
参考文献
致谢