锰对Sertoli细胞的体外毒性研究

摘要

目的：研究锰对体外培养Sertoli细胞的影响，探讨锰引起雄性生殖危害的作用机制。 方法：健康雄性20天龄SD大鼠睾丸，分离纯化Sertoli细胞并鉴定。培养第六天分别给以1，10，50，100，200μmol/L的MnCl2染毒，对照组给以同体积的DMEM培养液，24小时收集细胞。100μmol/L的MnCl2剂量组染毒细胞，分别于染毒第0h，6h，24h，48h收集细胞。采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测Sertoli细胞的苗勒管抑制物（MIS）、雄激素结合蛋白（ABP）和卵泡刺激素受体（FSHR）的mRNA表达。细胞染Mn24h后，用ELISA检测FSHR蛋白表达情况。 结果：与对照组比较，随着染毒剂量的增加（1，10μmol/L）ABP的mRNA表达先增加（P<0.01），但随着剂量继续增加（50，100，200μmol/L）ABP的mRNA表达降低（P<0.01），与10μmol/L浓度组比较，随着剂量增加（50，100，200μmol/L）ABP的mRNA表达降低，差异有显著性意义（P<0.01）；FSHRmRNA表达结果和上清液中FSHR蛋白质检测结果具有与ABP同样的趋势。与对照组比，MIS mRNA表达在各剂量组间均无显著性差异（P>0.05）。随着染毒时间增加，与对照组比较，ABP的mRNA表达先增加（6h）（P<0.05），但随着时间继续增加（24h，48h），ABP的mRNA表达降低（P<0.05）； FSHR的mRNA表达在染毒初期（6h）无明显改变（P>0.05），随着染毒时间增加mRNA表达降低（P<0.05，P<0.01）。 结论：50μmol/L以上锰浓度可降低Sertoli细胞ABP的转录水平，降低FSHR的转录和翻译水平，该作用可能是高剂量锰影响生精功能的作用机制之一。

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综述 Sertoli细胞的功能及研究进展

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