2型糖尿病伴牙周炎大鼠牙槽骨中OPG、RANKL的表达及相互关系

摘要

目的：首先分别建立单纯牙周炎、2型糖尿病、2型糖尿病伴牙周炎大鼠模型，免疫组化法检测其牙周病变组织（上颌第二磨牙牙槽骨）中骨保护素（OPG）和核因子κB受体活化因子（RANKL）的表达水平。然后采用人工重组OPG（rhOPG）对牙周炎组病变牙周组织局部注射后，免疫组化法再次检测这两种细胞因子在病变组织中的表达变化。旨在研究OPG和RANKL在牙周炎与2型糖尿病发病机制中所起的作用及其相互关系，并为rhOPG应用于牙周炎的治疗提供理论和实验依据。
　　 方法：将大鼠随机分成四组（A、B、C和D组）：A组采用上颌第二磨牙牙周局部结扎钢丝+10％高糖水喂食8周的方法建立大鼠牙周炎模型；B组采用高脂高糖饮食喂养6周+低剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型；C组采用局部结扎钢丝+高脂高糖饲料喂养+低剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病伴有牙周炎大鼠模型：D组为健康组。模型成功建立后采用心脏内灌注法处死大鼠，取其上颌患侧牙槽骨，4％多聚甲醛固定24小时后，10％EDTA脱钙2个月，石蜡包埋切片，免疫组化法检测四组大鼠病变牙槽骨中OPG、RANKL的表达水平。另取10只A组大鼠，去除结扎钢丝并行龈下刮治术，1周后随机分为2组（rhOPG注射组和对照组），rhOPG注射组于病变牙周局部注射rhOPG2次/1周，对照组不做处理。处死大鼠后同法取牙槽骨，免疫组化法检测牙槽骨中OPG、RANKL表达水平的变化。
　　 结果：1.OPG在健康组大鼠牙槽骨中表达水平最强，在2型糖尿病组、单纯牙周炎组、2型糖尿病伴牙周炎组表达水平依次减弱；组间比较，除单纯牙周炎组与2型糖尿病牙周炎组间比较无差异（P>0.05）外，其余各组间比较均有差异，存在统计学意义（P<0.05）。RANKL在2型糖尿病伴牙周炎组大鼠牙槽骨中表达水平最强，在单纯牙周炎组、2型糖尿病组、健康组表达水平依次减弱；组间比较，除单纯牙周炎组与2型糖尿病牙周炎组间比较无差异（P>0.05）外，其余各组间比较均有差异性，存在统计学意义（P<0.05）。2.牙用基础治疗+rhOPG局部注射比治疗前牙槽骨中OPG表达增强，RANKL表达减弱，其差异有统计学意义（P<0.05）；仅做牙周基础治疗的大鼠相比治疗前牙槽骨中OPG表达水平无差异（P>0.05），但RANKL表达水平减弱（P<0.05）：牙周基础治疗+rhOPG局部注射组与仪行牙周基础治疗组相比，OPG表达水平增强，RANKL表达水平减弱，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　 结论：1.通过分析OPG、RANKL在四组大鼠牙槽骨中的表达强弱，推测OPG与RANKL的失衡可能是导致牙周炎发生发展的主要原因之一，RANKL/OPG之比与牙周炎的严重程度呈正相关；2型糖尿病作为全身因素可能导致大鼠本身对牙周炎的高度易感性，加快OPG与RANKL的失衡，促进牙周炎的发生、发展。2.牙周基础治疗仅可以使牙周炎大鼠牙槽骨中RANKL表达减弱，而对OPG的表达无明显影响；而牙周基础治疗配合rhOPG局部注射不仅使牙周炎大鼠牙槽骨中RANKL表达减弱，还可以使OPG的表达增强，从而达到抑制牙槽骨吸收，改善牙周炎的效果。这为进一步了解2型糖尿病牙周炎发生的机制和完善牙周炎的治疗提供实验基础。

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