江西青霉次生代谢产物的分离纯化及其细胞毒作用

摘要

目的：从江西青霉菌丝体分离获得具有抗肿瘤活性的先导化合物。方法：采用多种色谱法对江西青霉发酵菌丝体中的次生代谢产物进行分离纯化，应用质谱、核磁共振等波谱技术鉴定单体化合物的化学结构；利用磺酰罗丹明蛋白染色法测定待测样品的细胞毒作用；应用DNA含量流式细胞术分析法进行肿瘤细胞周期分析。结果：共分离获得500余分离部位和19个单体化合物，并鉴定出11个单体化合物的化学结构，其中化合物CJ-01（ergosta-3，7，22-trien一5，9-dione-6，10（01）-ester）是一个具有新骨架的化合物，另外10个已知化合物分别为：麦角甾醇、5α-麦角甾-7，22-二烯-3β-醇、尿嘧啶、腺嘌呤、腺嘌呤核糖核苷、尿嘧啶核苷、丁二酸、烟酸、十八烷酸-α-单甘油酯和二十四烷酸。化合物CJ-01对多种不同组织来源的人源性肿瘤细胞均有明显细胞毒作用，其对A-549、SGC-7901两株肿瘤细胞的细胞毒作用呈剂量依赖关系，相应的IC50值分别为2.93±0.13μM和1.38±0.38μM，并且在36-72h范围内化合物CJ-01对SGC-7901肿瘤细胞的细胞毒作用随时间延长而增强，呈时间依赖关系。结论：从江西青霉菌丝体中分离到11个化合物，其中新化合物CJ-01具创制抗肿瘤新药的潜力。

目录

文摘

英文文摘

1 前言

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 菌种

2.1.2 人源肿瘤细胞株与正常细胞株

2.1.3 主要试剂

2.1.4 主要实验仪器与耗材

2.1.5 主要试剂的配制

2.1.6 待测样品的配制

2.2 方法

2.2.1 菌丝体制备

2.2.2 分离与纯化

2.2.3 单体化合物的结构解析与数据归属

2.2.4 细胞毒效应实验

2.2.5 细胞周期分析

2.2.6 统计学处理

3 结果

3.1 单体化合物的结构与名称

3.2 单体化合物的结构鉴定与波谱数据归属

3.2.1 新化合物

3.2.2 已知化合物

3.3 抗肿瘤活性筛选

3.3.1 实验条件的确证

3.3.2 江西青霉抑制肿瘤细胞生长活性组分的筛选

3.4 新化合物制肿瘤细胞生长的细胞毒效应

3.5 新化合物对正常细胞的影响

3.6 新化合物对肿瘤细胞周期的影响

4 讨论

结论

创新点

参考文献

虫草属真菌的生物活性(综述)

参考文献

致谢

英汉缩略词对照表

附录Ⅰ攻读硕士期间发表论文及参加学术活动

附录Ⅱ单体化合物的部分谱图