孕早期宫颈粘液中女胎细胞鉴定并用于产前诊断的可行性研究

摘要

目的：本课题拟使用实时荧光定量PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析宫颈粘液中细胞总DNA在STR基因位点的差异性，以达到鉴定女性胎儿来源的细胞或遗传物质的目的。
　　 方法：收集180例孕6-10周在遵义医学院附属医院妇产科门诊行人工流产妇女的宫颈粘液，并同时取其人流后的绒毛，采用直接法分析染色体核型以确定流产胎儿性别，选取经核型分析为孕女性胎儿的宫颈粘液标本40例，提取宫颈粘液中细胞DNA，采用实时荧光定量PCR对D21S11、D21S1411、D21S1412、D21S1414基因进行扩增，以β-globin基因作为阳性内对照，并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染分析扩增产物长度。
　　 结果：在40例确定为孕女性胎儿的DNA标本中，均扩增出特异性片段，经聚丙烯酰胺凝胶银染结果发现，40例标本中有27例在D21S11、D21S1411、D21S1412、D21S1414这4个基因位点呈现完全阳性结果。
　　 结论：1、孕早期妇女宫颈粘液中可以获取女性胎儿细胞或遗传物质，为无创产前诊断提供了一种新的思路；2、扩增常染色体上的多态性微卫星序列可以作为鉴定女性胎儿的方法之一。