补体C3a、类胰蛋白酶与羊水栓塞关系的实验室研究

摘要

目的：羊水栓塞发病急骤、病程进展迅速、死亡率高，常常引起产科纠纷，迄今为止除了定义肺循环的病理性栓塞外没有确切的诊断标准，给法医鉴定带来一定的困难。本课题通过检测产科尸检病例肺组织中的类胰蛋白酶、补体C3a的表达，从免疫介导、过敏角度探讨羊水栓塞的发病机制。
　　 材料和方法：本课题的标本均来自贵州省遵义医学院附属医院病理科及遵义医院。选取近10年产科尸检病例28例，临床高度怀疑羊水栓塞、尸检明确诊断为羊水栓塞病例4例(羊水栓塞组)；临床诊断为产后出血而尸检及HE染色未发现明显羊水有形成分的病例16例(产后出血组)(包括2例产后出血且HE染色高度可疑羊水栓塞病例)；其他8例(阴性对照组)死因分别为：围产期心肌病、妊娠期高血压疾病、麻醉意外、晚孕疤痕子宫破裂出血、妊娠期外伤、妊娠合并慢性肾炎等。采用免疫组织化学染色检测类胰蛋白酶和补体C3a、角蛋白在肺组织中的表达。结果判定以肺小动脉或者肺毛细血管内、外出现棕黄色颗粒为阳性结果。所得数据采用SPSS16.0处理，用四格表的Fisher确切概率法计算，如P≤0.05结果有统计学意义，如P>0.05无统计学意义。
　　 结果：尸检明确诊断为羊水栓塞的4例病例，肺组织HE染色观察到鳞状上皮或胎粪小体，类胰蛋白酶(TPS)表达均呈阳性，角蛋白表达均呈阳性，补体C3a表达与阴性对照组比较下降，表达极弱阳性。16例临床诊断为产后出血而尸检及HE染色未观察到鳞状上皮、胎粪小体、胎脂及粘液等羊水有形成分，包括2例产后出血且HE染色高度可疑羊水栓塞病例，其类胰蛋白酶阳性表达9例，角蛋白阳性表达7例，补体C3a弱阳性表达的7例；其他死因的8例病例，HE染色没有观察到羊水有形成分，胰蛋白酶表达呈弱阳性1例，余呈阴性，补体C3a均表达阳性，角蛋白阳性表达2例。补体C3a的弱阳性率(与对照组比较下降)：羊水栓塞组与阴性对照组比较、产后出血组与阴性对照组比较均有差异(P<0.05)，具有统计学意义；类胰蛋白酶的阳性率：羊水栓塞组与阴性对照组、产后出血组与阴性对照组比较均有差异(P<0.05)，具有统计学意义。
　　 结论：1.羊水进入母体后激发内源性介质的释放，发生一系列反应，引起肥大细胞脱颗粒，分泌大量的类胰蛋白酶；类胰蛋白酶在羊水栓塞病例及一些产后出血病例的肺组织表达阳性，提示羊水栓塞可能与过敏反应有关。2.补体C3a表达弱阳性，与阴性对照组比较，大幅度降低，提示在羊水栓塞中可能存在补体活化途径。3.不明原因的产后出血可能与羊水成分所激发的过敏反应有关。4.角蛋白染色阳性，说明检测到了细胞角蛋白，但是其来源却无法判断。因此不能单一的把检测到细胞角蛋白作为判断羊水进入母体血循环引起一系列临床症状的依据，需要联合其他的检测指标来判定。